Die gasometr. Bestimmung von primär, aliphatischen Aminostickstoff etc. 1009 



tion selbst bei Gegenwart von reagierenden Aminosäuren (durch den großen 

 Überschuß von Nitrit wird die Konzentration desselben nahezu konstant ge- 

 halten). Dieser Umstand ermöglich es^), die Bestimmung des Amino- 

 säurestickstoffs vorzunehmen, ohne den Harnstoff vorher zu entfernen, so 

 daß also eine hydrolytische Behandlung unnötig ist. Die so erhaltenen Re- 

 sultate sind natürlich nicht an Genauigkeit mit denjenigen vergleichbar, die er- 

 zielt werden, wenn der Harnstoff vorher entfernt worden ist. Sie sind 

 aber doch bis 0'?)% des Gesamtstickstoffs des Urins zuverlässig und ge- 

 nügend, um irgend eine erhebhche \'ermehrung des Aminostickstoffs nach- 

 zuweisen. Die Methode wird, wie folgt, ausgeführt: 



100 cm^ Urin werden mit 4 g Natriumhydrat versetzt und mittelst 

 mehrstündigen Durchleitens eines kräftigen Luftstroms vom Ammoniak 

 ])efreit. Es ist ziemlich schwierig, das Ammoniak auf diese Weise voll- 

 ständig zu verjagen. Die zurückbleibenden Spuren beeinflussen aber die 

 Resultate nicht merklich, denn das Ammoniak reagiert nur langsam mit 

 salpetriger Säure, und infolgedessen wird es fast vollständig mit dem 

 Harnstoff anstatt mit den Aminosäuren bestimmt. 



Nachdem das Ammoniak entfernt worden ist. wird der Urin mit 

 Essigsäure angesäuert, auf dem Wasserbade konzentriert und schließlich 

 auf ein Volumen von 50 crn^ gebracht. Mit je 10 cm^ führt man zwei 

 Aminobestimmungen aus, und zwar die eine genau im Verlauf von sechs 

 Minuten, die andere während zwölf Minuten, gerechnet von dem Zeitpunkte, 

 bei dem der Urin mit der salpetrigen Säure gemischt wird. Bei diesen 

 Bestimmungen läßt man die Lösungen 5 und 11 Minuten lang ruhig 

 stehen und schüttelt erst während der letzten Minuten um. Der Unter- 

 schied zwischen den beiden Resultaten repräsentiert die Menge Stickstoff, 

 die vom Harnstoff während 6 Minuten abgegeben worden ist. Durch 

 Subtraktion dieser Differenz von dem Ergebnis, das man bei der Bestim- 

 mung in 6 Minuten erhalten hat, wird die Stickstoffmenge, die aus den 

 Aminosäuren stammt, gefunden. 



Für die Genauigkeit des Verfahrens ist es wichtig, daß genau die- 

 selben Volumina aU' der erforderlichen Lösungen bei beiden Amino- 

 bestimmungen benutzt und daß beide bei gleicher Temperatur ausgeführt 

 werden. Mit besonderer Sorgfalt muß man auch darauf achten, daß, nach- 

 dem die Luft im Apparat durch Stickoxyd während des ersten Stadiums 

 der Bestimmung vertrieben worden ist, dasselbe Volumen von salpetriger 

 Säurelösung in der Zersetzungsflasche (Z) in der Fig. 201) hinterbleibt. Dies 

 wird leicht so bew-erksteUigt, daß man die Lösung aus D in den Zyhnder 

 Ä genau bis zur Marke von 25 cm^ zurücktreibt, ehe der Urin in D ein- 

 gelassen wird. 



Falls die Temperatur unter 19*^ ist, muß die Zeit der Reaktion auf 

 7 und 14 Minuten ausgedehnt werden und bei einer Temperatur unter 

 15^ auf 8 und 16 Minuten. 



') Dieser Gedanke wurde zuerst von Dr. P. Ä. Levene ausgesprochen. 



Abderhalden. Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. V. 64 



