Die Methoden der biologischen Mikrochemie. 1 IQ5 



frischen ersetzt und dies wird am Ende des zweiten Tages wiederholt. 

 Die Behandlung mit Alkohol soll auf keinen Fall weniger als 48 Stunden 

 dauern. Ein längeres Verweilen in Alkohol beeinträchtigt nicht den Wert 

 der Präparate. Die zur Behandlung erforderlichen Gefäße müssen durch- 

 aus sauber sein und die zu verwendenden Schneidinstrumente frei von 

 Rost oder von irgend einer Eisenverbindung. 



Liegen Protozoen oder Protophyten zur Untersuchung vor, so nmli 

 man zu der betreffenden Flüssigkeit soviel Alkohol zufügen, daß eine 

 Konzentration von 90'Vo resultiert. Nach 24 Stunden können die Orga- 

 nismen durch 3 oder 4 Minuten langes Zentrifugieren mittelst einer ge- 

 wöhnhchen klinischen Zentrifuge abgetrennt werden ; dann wird mit Alkohol 

 dekantiert und frischer Alkohol zugefügt. Wenn das Untersuchungsmaterial 

 genügend gehärtet ist, wird es mit den geeigneten Reagenzien zur Demon- 

 stration des organischen und anorganischen Eisens behandelt. 



Handelt es sich um Gewebe, so müssen sie, nachdem sie genügend 

 gehärtet sind, so zerteilt werden, wie es füi' histologische Studien gebräuch- 

 lich ist. Sind es pflanzliche Präparate (Blatt, Stengel), so muß die Zerteüung 

 mit freier Hand vorgenommen werden, und zwar mit einem Messer, das 

 mit Alkohol befeuchtet ist. Solche Präparate müssen in Alkohol aufbewahrt 

 werden, bis man sie zur Demonstration des vorhandenen Eisens benutzt. 

 Zur Ge'VN'innung von Schnitten tierischer Gewebe und Organe dienen die 

 beiden folgenden Methoden: 



1. Die Paraffinmethode und 2. die Behandlung mit dem Kälte- 

 miki'otom. 



1. Bei dem ersten Verfahren wird das Material aus absolutem 

 Alkohol in Chloroform übergeführt und darin für einen Tag belassen, dann 

 legt mau es in eine gesättigte Lösung von Paraffin und Chloroform und 

 läßt es darin bei 35° wieder einen Tag, und endlich ^drd es ebensolange 

 in schmelzendem Paraffin bei 55*^ C belassen. (Das verwendete Paraffin 

 darf nicht höher als bei 53° C schmelzen.) Das Schneiden der Präparate 

 zu einer Stärke von 5 — 15 jj- vdrd in der gewöhnhchen Weise vorge- 

 nommen. Das anhaftende Paraffin wird durch Xylol und das letztere durch 

 absoluten Alkohol entfernt. Die Schnitte werden bis zur Untersuchung in 

 Alkohol aufbewahrt. 



2. Werden die Präparate mittelst des Gefrierprozesses dargestellt, so 

 wird das Material eine halbe Stunde lang in völlig reines destilliertes 

 Wasser gelegt und dann werden mit einem Mikrotom Schnitte hergestellt; 

 hierzu bedient man sich als Gefriermittel vorteilhaft flüssiger Kohlen- 

 säure. Die Dicke der Schnitte sollte nicht mehr als 20 .a betragen, mög- 

 lichst aber noch weniger. Die so dargestellten Präparate werden bis zur 

 nachherigen Behandlung in absolutem Alkohol aufbewahrt. 



a) Der Nachweis von anorganischen Eisenverhindungen. 



Um das Vorhandensein und die Verteilung von anorganischem Eisen 

 in den nach einer der obigen Methoden dargestellten Präparaten nachzu- 



Abderhalden, Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. V. 70 



