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werden, als dem Eisen der vorhandenen anorganischen Eisenverbindungen 

 entspricht. 



Wenn daher Ammoniumsulfid oder das Säure-Ferrocyanidreagens 

 zum Nachweis von anorganischen Eisenverbindungen in einem Gewebe ge- 

 braucht werden, müssen die erhaltenen Kesultate immer durch Präparate 

 desselben Gewebes oder Organes, die mit wässeriger Hämatoxylinlösung 

 in der bereits beschriebenen Weise behandelt worden sind, kon- 

 trolliert werden. 



h) Der Nachweis von organischen oder .,maskierten" Eisen- 



verbindungen. 



Der Nachweis des organischen oder „maskierten" Eisens ist im 

 ganzen ein vie\ schwierigerer Prozeß als der zur Bestimmung von anor- 

 ganischen Eisenverbindungen. Er besteht in der vorsichtigen Infreiheit- 

 setzung von festgebundenem Eisen aus seinen Verbindungen durch ver- 

 längerte Einwirkung von frisch präpariertem saurem Ammoniumsulfid, 

 NH4HS, in Glyzerin auf die isolierten, bei einer Temperatur von umgefähr 

 60" C gehärteten Zellen. Da dieses Pteagens außerordentlich wirksam auf 

 Eisen ist^), müssen die bei dieser Methode verwendeten Gefäße, Objekt- 

 träger, Deckgläser und Flüssigkeiten unbedingt frei von Eisen sein. Dies 

 ist eine schwer zu erfüllende Anforderung! In Anbetracht der Wichtigkeit, 

 welche die zu lösenden Probleme auf dem Gebiete der Zytochemie haben, 

 muß ihr aber unbedingt in jeder Beziehung nachgekommen werden. Man 

 braucht eine Lösung von saurem Ammonium sulfid und von Glycerin in 

 Wasser in einer Konzentration von öO^/q. Das Sulfid wird dargestellt durch 

 Einleiten von Schwefelwasserstoff, der zuvor eine Waschflasche passiert 

 hat, in eine Ammoniaklösung von der Dichte 0"96. Die Flasche, die das 

 Ammoniak enthält , muß von jeder Spur Eisen befreit worden sein , und 



*) Im Reagenzglas kann man mit Ammoniumsnlfid noch 1 Teil Eisen in 1000000 

 Teilen "Wasser nachweisen. Diese Reaktion ist noch ganz deutlich, wenn man sie mit 

 Kontrollproben vergleicht, die mittelst Wassers und Ammoniumsulfids angestellt sind. 

 Das Säure-Ferrocyanidreagens ist von gleicher Empfindlichkeit. Durch das Mikroskop 

 wird der Nachweis der Empfindlichkeitsgrenze beider Reagenzien beträchtlich verstärkt. 

 Es ist sehr gut möglich, daß ein Schnitt, nach der einen oder andern Methode be- 

 handelt, dem bloßen Auge kein Eisen erkennen läßt, während er, unter dem Mikroskop 

 bei gutem Licht betrachtet, unendlich kleine Mengen Eisen anzeigt. Schorl (Zeitschr. für 

 analyt. Chemie. 46. S. 659) fand, daß mittelst dieser Reaktion, nach der gewöhnlichen 

 analytischen mikrochemischen Methode untersucht, bei Verwendung eines Mikroskops, 

 dessen lineare Vergrößerung 70 beträgt, noch die Gegenwart von 0000002 mg Eisen 

 nachgewiesen werden kann, während bei der Reagenzglasprobe mit dem bloßen Auge 

 nur O'Ol niff durch dieselbe Reaktion feststellbar sind. Bei biologisch-mikrochemischen 

 Untersuchungen steht die Empfindlichkeit allerdings nicht in Proportion zur mikro- 

 skopischen Vergrößerung, aber mau kann doch als sicher annehmen, daß die Empfind- 

 lichkeit zehnmal vermehrt ist. Andererseits ist Ammoniumsulfocyanid viel weniger 

 empfindlich bei der Reagenzglasprobe als Ammoniumsulfid oder das Säure-Ferrocyanid- 

 gemisch, und für biologiscli-mikrochemische Untersuchungen ist es überhaupt 

 unbrauchbar. 



