Die Methoden der biologischen Mikrochemie. 1119 



von Octopus nachweisen. A. B. Macallum konnte es ebensowenig in 

 den Muskeln des Hummers und der Krabbe auffinden. 



Da der mit dem Kobaltdoppelsalz, CoNa.2 (NO.,)^. erzeugte Kreatin- 

 niederschlag ^iel leichter löslich ist als die Kaliumverbindung, so kann man 

 aus Muskelfasern, in denen man eine Fällung vorgenommen hat, das Kreatin- 

 salz, zum größten Teile wenigstens, dui'ch häufiges Waschen mit eiskaltem 

 Wasser entfernen. Das letztere ist jedoch bei Untersuchung von Muskel- 

 fasern der Vertebraten nicht unbedingt nötig, denn das Kreatin und Ka- 

 hum finden sich in diesen Oeweben in ganz ähnlicher Weise verteilt. 



Die Form der Kristalle und die orangegelbe Farbe des Kahumsalzes 

 erleichtern seinen Nachweis außerordenthch, wenn es in den zu unter- 

 suchenden Geweben in bemerkenswerten Giengen vorhanden ist. Wenn es 

 dagegen in sehr geringen Mengen oder nur in Spuren in einem Gewebe 

 oder in einer Zelle auftritt, bleibt der kristallinische Niederschlag aus und 

 es ist auch möglich, daß selbst keine gelbe Färbung zu beobachten ist. 

 Man muß daher dann eine etwas andere Methode anwenden, um die Gegen- 

 wart des Kobaltsalzes deutlich nachweisen zu können. Eine solche Methode 

 wurde von Macallum aufgefunden. Sie besteht in der Anwendung einer 

 sauren Ammonium sulfidlösung (1 Teil Sulfidreagens und 1 Teil Wasser), 

 die mit dem Kobalt augenblicklich unter Bildung von schwarzem Kobalt- 

 sulfid reagiert. Wenn also nach solcher Behandlung in einem Gewebe die 

 schwarze Fällung auftritt, so ist dadurch bewiesen, daß Kaliumsalz vor- 

 handen war. Da der schwarze Niederschlag sehr leicht wahrzunehmen ist, 

 so ist es daher auch nicht schwer, sich über Vorkommen und Verteilung 

 selbst von Spuren von Kalium zu vergewissern. 



Das Kobaltreagens muß bei der Untersuchung von Zellen und Ge- 

 weben in der W^eise gebraucht werden, daß es auf einmal in alle Teile der 

 betreffenden Präparate eindringen kann. Bei einzelligen Organismen, 

 wie bei Infusorien oder Hefezellen, ist dies leicht zu bewerkstelügen. 

 Die Flüssigkeit, in der sie sich befinden, wird mit ungefähr zwei 

 Volumina des Reagenzes gemischt und die Masse dann wenigstens 

 eine halbe Stunde . aber nicht länger als zwei Stunden , stehen ge- 

 lassen. Durch diese Behandlung wird die erwünschte Wirkung, die Zellen 

 zu fixieren, erreicht. Das Eindringen des Pieagenzes und die Fällung des 

 Kahumsalzes sind bereits in weniger als ^ ., Minute, in einigen Sekunden, 

 vollständig erfolgt. Die Mischung wird nun ungefähr fünf Minuten lang 

 zentrifugiert 1), dann wird die überstehende Flüssigkeit abgegossen, mit 

 eiskaltem Wasser versetzt, \sieder drei Minuten lang zentrifugiert. worauf 

 die Flüssigkeit wieder abgegossen mi^. Dieser Prozeß wird 4- oder ömal 

 wiederholt. Wenn dann das Kobaltreagens auf diese Weise völhg entfernt 

 worden ist, ^\ird der Niederschlag mit der 5- oder 6facheu Menge seines 

 Volumens absoluten Alkohols übergössen und zur vollständigen Härtung so 



^) Zu diesem Zwecke genügt eine kleine Zentrifuge, wie man sie zur Trennung 

 des Salzes und der Kristalle im Urin benutzt. 



