Die Methoden der biologischen Mikrochemie. 1121 



es hier gut auseinander. Nachdem das Reagens V2 Stunde auf die isolierten 

 Fasern eingewirkt hat, gießt man den Überschuß der Kobaltlösung ab und 

 fügt eiskaltes Wasser hinzu. Nach 5 Minuten wird dies ebenfalls abge- 

 gossen und durch frisches eiskaltes Wasser ersetzt. Man wiederholt diese 

 Operation 4 — 5mal oder bis das Waschwasser endlich farblos erscheint, 

 d. h. bis es auf Zusatz einiger Tropfen Ammoniumsulfids keine Reaktion 

 auf Kobalt mehr gibt. Das rückständige Zellenmaterial wird dann mit einer 

 Pipette aufgesaugt und auf einen Objektträger gebracht: man versetzt 

 hierauf mit einem Tropfen der Glyzerin-Ammoniumsulfidmischung, bedeckt 

 mit einem Deckgläschen und untersucht. 



Liegen einzellige Organismen vor, so verliert man durch das be- 

 schriebene Dekantieren mit Wasser einen großen Teil der kleineren Ge- 

 webspartikelchen. Um dies zu verhüten, kann man sich mit A'orteil einer 

 Zentrifuge bedienen. Durch wiederholtes Zentrifugieren mit eiskaltem 

 Wasser, das nach jeder Drehungsperiode, die 3 — 5 Minuten lang dauern 

 soll, erneuert wird, erhält man schUeßlich ein Sediment, von dem man 

 mittelst der Pipette genügend charakteristische Gewebsproben zum Einlegen 

 in die Glyzerinsulfidmischung entnehmen kann. 



Nach der beschriebenen Methode kann man in den isolierten Zellen 

 und Gewebsteilen ziemlich genau die Verteilung der Kaliumsalze bestimmen. 

 Aber wenn die Präparate als gänzlich typisch (natürlich) gelten sollen, so 

 kann man gegen die erwähnte Art der Präparierung einen ernsthaften 

 Einwand erheben : auf der Oberfläche der isoHerten Zellen und Fasern hat 

 nämlich das Fluidum nicht dieselbe Zusammensetzung wie die normale 

 Lymphe, welche die Oberfläche der intakten Gewebe und Organe während 

 des Lebens umgibt. Physikalische Bedingungen, vor allem Oberflächen- 

 tensionen, verursachen Lösungsverdichtungen, auch solche der Kaliumsalz- 

 lösungen auf der äußersten Oberfläche des Zellgewebes. Eine derartige 

 Verdichtung kann nur selten in den ausgezupften Geweben nachgewiesen 

 werden. Dieser Einwand kann nicht gegen solche Schnitte frischen Gewebes 

 erhoben werden, die mit dem Gefriermikrotom geschnitten und noch im 

 gefrorenen Zustande in das Kobaltreagens gebracht worden sind. Bei 

 diesem Verfahren ^ird die Diffusion der Lösungen vor dem Ein- 

 dringen des Reagenzes sehr beträchtlich vermindert oder überhaupt voll- 

 ständig verhindert, denn das Reagens dringt augenblicklich in alle Teüe 

 der Schnitte ein. Solche Präparate, welche die Verteilung der Kaliumsalze 

 zeigen, können nicht nur innerhalb, sondern auch außerhalb der Zellen er- 

 halten werden, und zwar in einer Weise , daß auch die örtliche Konzen- 

 tration beobachtet werden kann, die nach dem Gibbs-Thomsonschen Lehr- 

 satz, d. h. auf Grund der Adsorption oder Oberflächenkondensation von 

 Lösungen, dank der Oberflächenspannung, stattfindet. 



Wie schon in der Einleitung dieser Arbeit (vgl. S. 1100) gezeigt worden 

 ist, kann mittelst des Gefiierprozesses, nach theoretischen Gründen, eine 

 geringe Veränderung in der Verteilung der Salze in einem Zellgefüge her- 

 vorgerufen werden: praktisch ist aber eine solche Verteilungsänderung nicht 



Abderhalden. Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. V. 71 



