Die Methoden der biologischen Mikrochemie. 1125 



Eine spezielle, charakteristische Farbreaktion für den vorliegenden 

 Zweck wurde von Grandis und Ma'tnani ^) einiieführt. Das von ihnen ge- 

 brauchte Reagens war Purpurin oder 1.2,4-Trihydroxvanthrachinon: 



CO OH 



Eine in 95" Vg^^ Alkohol gesättigte Lösung dieser Substanz gibt 

 mit Calciumsalzen. und zwar besonders mit Calciumchlorid einen in Alkohol 

 und in Wasser unlöslichen Niederschlag. Die Lösung zeigt keine Neigung, 

 andere Gewebsteile zu färben, als diejenigen, die Calcium enthalten, vor- 

 ausgesetzt, daß man sie nicht zu lange einwirken läßt. 



Die oben genannten Forscher bedienten sich zum Nachweis des Cal- 

 ciums in Geweben mittelst des erwähnten Chinon-Reagenzes folgender 

 Methode : Das Gewebe kann dabei im frischen oder gehärteten Zustande 

 untersucht werden. Im ersten Falle werden mit Hilfe der Gefriermethode 

 Schnitte des Gewebes bereitet. Im andern Falle werden die in Alkohol ge- 

 härteten Gewebe mittelst der Einbettmethode zerlegt. Die so erhaltenen 

 Schnitte werden in eine gesättigte alkohoUsche Purpurinlösung gelegt und 

 darin belassen, bis sie stark rot gefärbt sind, was für gewöhnlich nach 

 5 — 10 Minuten der Fall ist. Die tiefe Färbung ist nicht gleichmäßig. Sie ist 

 auf die verkalkten Teile beschränkt. Die Schnitte werden nun in eine 0"75Voige 

 Natriumchloridlösung gebracht. Hier findet eine doppelte Umsetzung 

 zwischen dem Calciumsalz und dem Chlorid statt, wobei in sehr geringer 

 Menge Calciumchlorid, Natriumphosphat und Karbonat entstehen. Da, wo 

 sich die Spuren Calciumchlorid bilden, wird Purpurin gefällt. 



Es ist übrigens nicht unbedingt nötig, die Schnitte mit Natrium- 

 chlorid zu behandeln, denn in den fraglichen Geweben ist genug Calcium- 

 chlorid vorhanden, um die Purpurinfällung zu ermöglichen. Die Anwendung 

 der Natriumchloridlösung bietet jedoch den Vorteil, die Färbung deut- 

 licher und schärfer erscheinen zu lassen. Wenige ^Minuten der Einwirkung 

 genügen bereits, um diese Wirkung hervorzurufen. Hierauf werden die 

 Schnitte in TO^/oigen Alkohol gelegt und der letztere wird so oft erneuert 

 bis er kein gefärbtes Produkt mehr extrahiert. Dann wird mit absolutem 

 Alkohol entwässert und in Balsam eingebettet. 



Die eben beschriebene Probe kann in gewissen Fällen zweifellos gute 

 Dienste leisten, nämlich falls das Calcium in einem Schnitte sehr reichlich 

 vorhanden ist, wie z. B. in einem verkalkten Fötusknochen. Sie ist aber 

 bei weitem nicht empfindlich genug, um das Calcium in dem Zellproto- 

 plasma anderer Gewebe nachzuweisen , denn das Pm*purin wird bereits 



^) Grandis und JSIainaui, Sur uue reaction coloree, <iui permet de revelei" les 

 sels de calcium deposes dans les tissus organiques. Archiv ital. de Biolog. 34. 73 (1900). 



