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kation des für den Nachweis der Lokalisation der Schwefelsäure, die als 

 Sulfat in der Niere vorhanden ist, weiter unten beschriebenen Verfahrens. 

 Die dabei zu gebrauchenden Reagenzien sind : 1. schwefelsäurehaltiger 

 Alkohol, der aus 2 Vol. Schwefelsäure (spez. Gew. r84) und 100 Vol. ab- 

 soluten Alkohols besteht: 2. eine Bleiacetatlösung in ,- -Verdünnung: 3. eine 



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Lösung von Glyzerin-Ammoniumsulfid, die durch Verdünnung von reinem 

 Glyzerin mit einem äquivalenten Volumen sauren Ammoniumsulfids be- 

 reitet ist. 



Die Ausführung des Verfahrens gestaltet sich , wie folgt : Wenn es 

 sich um einzellige Gefüge handelt werden sie noch ganz frisch in den 

 Säurealkohol gebracht und 20 Minuten darin belassen, hierauf wird etwa 

 5 — 6mal sorgfältig mit absolutem Alkohol gewaschen, um jede Spur freier 

 Säure zu entfernen, dann zur Abtrennung der Organismen zentrifugiert 

 und schließlich für eine halbe Stunde in die Bleiacetatlösung gebracht. Nun 

 wird sorgfältig mit destilliertem Wasser gewaschen, um das unveränderte 

 Reagens vollständig zu beseitigen, wozu man ^^"ieder die Zentrifuge be- 

 nutzt. Dann bringt man wieder eine kleine Menge des Sediments auf einen 

 Objektträger, fügt einen Tropfen Glyzerinsulfid hinzu und bedeckt mit 

 einem Deckgläschen. Wenn ein anderes Gewebe auf seinen Calciumgehalt 

 zu untersuchen ist, werden die Schnitte nach der beim Nachweis der Ver- 

 teilung des Kaliums beschriebenen Methode dargestellt. Man läßt die Schnitte 

 gefrieren und bringt sie flach in den schwefelsäurehaltigen Alkohol, wo 

 sie 20 Minuten lang verbleiben. Dann werden sie sorgfältig mit absolutem 

 Alkohol gewaschen, um die freie Säure vollständig zu entfernen und nun 

 30 Minuten in die Bleiacetatlösung gelegt. Nachdem sie dann mit destil- 

 liertem Wasser so lange gewaschen worden sind, bis keine Spur unan- 

 gegriffenen Bleiacetats mehr vorhanden ist, werden sie auf Objektträger 

 in das Glyzerinsulfidreageus eingelegt. 



Sowohl in diesen Schnitten, als auch in den Präparaten der einzelligen 

 Organismen wird die ursprüngliche Verteilung des Calciums durch das 

 Auftreten des Bleisulfidniederschlags nachgewiesen. Der säurehaltige Al- 

 kohol führt das anorganische Calcium in Calciumsulfat über, welches völlig 

 unlöslich in Alkohol ist. Das Calciumsulfat reagiert mit dem Bleiacetat 

 unter Bildung von Bleisulfat, das in Wasser unlöslich, aber farblos ist. 

 Das Bleisulfat gibt dann mit dem Ammoniumsulfid die schwarze Blei- 

 sulfidreaktion. 



Bei diesem Verfahren liegt vielleicht eine Fehlerquelle darin, daß der 

 schwefelsäurehaltige Alkohol die Phosphorsäure aus den Phosphaten nicht 

 extrahiert. Die letzteren köiuien sich nämUch mit dem Blei unter Bildung 

 von Bleiphosphat verbinden, das sich in Wasser noch weniger löst als Blei- 

 sulfat. Um diesen möglichen Fehler zu vermeiden, sollte man nach der 



Behandlung mit Bleiacetat 2 oder 3 Minuten lang mit —Salpetersäure 



waschen, wodurch das Bleiphosphat rasch extrahiert, das vorhandene Blei- 



