Die Methoden der biologischen Mikrochemie. 1 141 



Ganz anders als den erwähnten Substanzen gegenüber verhält sich 

 nun die Salpetersäure zum Caseinogen. A. B. Macullum^) fand, daß eine 

 Salpetersäure vom spez. Gew. V2 (HNO3 = 32''/o) bei 35" C selbst nach 

 zweiAvöchentlicher Einwirkung nicht die geringste Menge Phosphor als Pho.s- 

 phorsäure freimacht, und daß nach 2 Monaten nur mnzig kleine Spuren 

 der letzteren nachzuweisen sind. Daraus geht also zweifellos hervor, daß 

 zwischen der Art der Phosphorbindung in Nukleinverbindungen und andrer- 

 seits derjenigen in den Phosphorproteiden ein wesentUcher Unterschied 

 besteht. 



Nach dem oben Gesagten ist es klar, daß das Reagens, das zum 

 raakrochemischen Nachweis der Phosphorsäure zu benutzen ist, auch unter 

 gewissen Bedingungen bei der mikrochemischen Untersuchung die Phos- 

 phorsäure aus den betreffenden Nukleinverbindungen frei macht und 

 demonstriert. Das Keagens, das für diesen Zweck gebraucht wird, 

 ist das Salpetersäuremolybdat von Fresenius. Es wird so dargestellt, 

 daß genau 1 Teil reiner ^Nlolybdänsäure (M0O3) in 4 Teilen starken Am- 

 moniaks (spez. Gew. 0'88) gelöst wird, und daß dann langsam 15 Teile 

 Salpetersäure vom spez. Gew. 1-2 hinzugesetzt werden. Diese Lösung zeigt 

 eine hellgelbe Färbung und liefert bei eintägigem Stehen einen gering- 

 fügigen Satz, von dem die klare Flüssigkeit abgegossen wird. Man be- 

 wahrt sie in einer mit Glasstopfen verschlossenen Flasche auf. 



Das erwähnte Reagens soll, wenn es in reichlicher Menge zu einer 

 Zwanzigstelnormallösung eines Phosphates gefügt wird, sofort einen Nieder- 

 schlag von Ammoniumphosphormolybdat erzeugen. Wenn sich dagegen der 

 Niederschlag bei Zimmertemperatur erst nach einiger Zeit bildet, ist 

 das Reagens für unsere Zwecke nicht gebrauchsfähig, deini eine Ver- 

 zögerung in der Bildung der Fällung kann Diffusion und Wiederverteilung 

 der Phosphorsäure nach sich ziehen. 



Der bei dieser Reaktion gebildete Niederschlag besteht aus Am- 

 moniumphosphormolybdat, welches, wenn das vorhandene Phosphat reich- 

 lich und frei von Proteinen vorhanden ist, in Form von oktaedrischen 

 Kristallen auftritt, das aber andrerseits, wenn eine Mischung von Phosphor- 

 säure oder Phosphaten mit Eiweißlösungen vorhegt, einen mehr oder 

 w^eniger amorphen Charakter, der durch die Gegenwart des Eiweißes be- 

 dingt wird, zeigt. In dem letztei-en Falle kann man nur nach mehrmahgem 

 Wiederlösen des amorphen Produktes in AmmoniaK und Fällen mit Sal- 

 petersäure die charakteristischen Kristalle erhalten. 



Die gelbe Färbung des Niederschlages genügt bereits, um seine Gegen- 

 wart in dem Reagensglas oder in einem Schnitte zu erkennen, falls die 

 Phosphorsäure in beträchtlicher Menge vorhanden ist. Wenn sie aber in 

 Lösungen oder in einejn Gewebe oder Zellelement nur in sehr geringiügigen 

 Mengen auftritt, kann die gelbe Farbe aUein nicht ausreichend sein, um 

 eine deuthche Unterscheidung zwischen der Phosphorsäurereaktion und der 



') Ä. B. Macallum, loc. cit. 



