Die Methoden der biologischen Mikrochemie. 1143 



Bei Vorliandensein von Globulinen und Albuminen verursacht das 

 Phenylhydrazin, in Gegenwart von Phosphorsäure und Phosphaten, keine 

 Pieduktion des Salpetersiiuremolybdatreagenzes. 



A. B. Macallum^) hat mit Lösungen von Eialbumin und Eiglobulin, 

 die mittelst wiederholten, mindestens achtmaligen Fällungen der Lösungen 

 der Proteine des Weißes vom Ei durch Sättigen mit reinem Ammonium- 

 sulfat gewonnen worden waren, mit dem Salpetersäuremolybdatreageus und 

 Phenylhydrazin keine Reaktion erhalten. Selbst nach einwöchentlicher Ein- 

 wirkung des Salpetersäuremolybdats bei 35" auf reines Eialbumin und Ei- 

 globulin ruft das Phenylhydrazin keine Reduktion der Molybdänsäure hervor. 

 Es ist daher anzunehmen, daß reine Proteine die fragliche Reaktion auf 

 Phosphorsäure nicht beeinflussen. 



Gewebe und Zellen, die in Alkohol gehärtet wurden, halten selbst 

 nach tüchtigem Auswaschen mit Wasser, leicht noch Spuren von Alkohol 

 zurück, und zwar besonders nahe der Ränder der Präparate. Infolgedessen 

 liefern die Schnitte der letzteren häufig, nachdem sie mehrere Tage lang 

 mit dem Salpetersäuremolybdatreageus behandelt worden sind und dann 

 mit einer Phenylh} drazinlösung versetzt werden, eine blaue Reaktion längs 

 der Ränder, wo naturgemäß der Alkohol zuerst in das Gewebe eingedrungen 

 ist. Durch dieses Zurückhalten von etwas Alkohol erwächst also der L'nter- 

 suchung des mit Alkohol gehärteten Gewebes in bezug auf die fragliche 

 Reaktion zweifellos ein Nachteil. 



Die besten Resultate, auf die man sich ohne weiteres verlassen kann, 

 werden an frischen Geweben und Zellen, und zwar in einer für das be- 

 treffende Untersuchungsobjekt jeweils angepaßten Weise erhalten. Wenn es 

 sich nur darum handelt, den anorganischen Phosphor, das ist die Phos- 

 phorsäure der Phosphate, zu bestimmen, so gebraucht man eine Methode, 

 die etwas verschieden ist von der, welche zum örtlichen Nachweis vom 

 Phosphor der Phosphorsäureester, wie in der Nukleinsäure und im Lecithin, 

 benutzt wird. 



Im ersteren Falle wird das Material, möge es unizellular oder in Form 

 gefrorener Schnitte frischen Gewebes vorliegen, in das Salpetersäuremolyb- 

 datreagens, dem eben vorher etwas einer 27üigen Phenylhydrazinhydrochlorid- 

 lösung zugesetzt wurde, gelegt. Es genügt. Aveun man 1 cm^ der Phenylhydra- 

 zinlösung zu je 5 cm^ des Reagenzes bringt. Auf diese Weise werden die 

 Phosphate bereits nach wenigen Sekunden erkenntlich gemacht. Das Phenyl- 

 hydrazin reduziert auf einmal alle Molybdänsäure im Reagens, das sich in 

 Kontakt mit der Phosphorsäure befindet und, da das blaue Molybdäuoxyd 

 unlöshch ist, so kann sein Vorkommen in einem Schnitte über die Ver- 

 teilung der Phosphorsäure ohne weiteres unterrichten. Nach Verlauf weniger 

 Minuten, nach denen sich bereits das Maximum der Reaktion entwickelt 

 hat, werden die Schnitte in Wasser gewaschen, dann auf einen Objekt- 



') über die Art und Weise, in der die wiederholte Fällung vorgenommen werden 

 kann, vgl. Macallum, Proc. Koy. Soc. B. 76 (1. c). 224—226 (1905). 



