1144 -A-. B. Macallum. 



träger gebracht und in Glyzerin eingebettet. Wenn es sich dagegen um 

 unizellulare Gebilde handelt, so benutzt man zu ihrer Abtrennung eine 

 einfache Zentrifuge. Durch wiederholtes Zentrifugieren einer Suspension in 

 destilliertem Wasser werden die Zellen dann von dem Salpetersäuremolybdat- 

 reagens befreit. Nun werden sie mittelst einer Pipette auf einen Objekt- 

 träger gebracht und hier in Glyzerin eingebettet. Derartige Präparate 

 sind nicht sehr lange haltbar, nicht länger als wenige Wochen. Sie sind 

 aber andrerseits sehr wertvoll, da sie in sehr empfindlicher Weise und 

 sehr deutlich die Verteilung der Phosphorsäure zeigen. 



Für den Nachweis des Phosphors der Phosphorsäureester kann die 

 beschriebene Methode unter Berücksichtigung einer gewissen Modifikation 

 gebraucht werden. Dabei kommt es zunächst darauf an, daß alle Spuren 

 der Phosphate entfernt werden. Da Ammoniumphosphormolybdat in Am- 

 moniak sehr leicht löslich ist. so ist das zu prüfende und bereits einige 

 Minuten lang mit Salpetersäuremolybdat behandelte Material frei an an- 

 organischem Phosphor, nachdem es wiederholt mit einer lO^/oigen Am- 

 moniaklösung extrahiert worden ist. Nun werden die Präparate, möge es 

 sich um einzeUige Organismen oder um gefrorene Schnitte von frischen 

 Geweben oder Organen handeln, in eine neue Portion des Salpetersäure- 

 molybdatreagenzes in eine absolut reine Glasstopfenflasche gebracht, die 

 in einem Wärmeschrank bei 35*" C für 1 — 4 oder 5 Tage aufbewahrt wird. 

 Darauf werden die Präparate in destilliertem Wasser gewaschen und, 

 nachdem sie 3 oder 4 Minuten lang mit einer ^"/oigen Phenylhydrazin- 

 hydrochloridlösung behandelt worden sind, auf einen Objektträger gebracht 

 und in Glyzerin eingebettet. Die Schnitte der alkoholgehärteten Gewebe 

 werden, nachdem sie mit Phenylhydrazin behandelt sind, gänzlich in W^asser 

 gewaschen, mit Alkohol entwässert, in Zedernöl oder in Xylol geklärt und 

 schließlich in Balsam eingebettet. 



Die Gegenwart von Lecithin in derartigen Gewebspräparaten verur- 

 sacht eine Komplikation. Obgleich das Lecithin auf Grund seiner Unlös- 

 lichkeit und demnach seiner Impermeabilität für das Reagens nicht leicht 

 von der Salzsäure des Pvcagons angegriffen wird, so gibt es doch nach einer 

 gewissen Zeit etwas von seinem Phosphor als Phosphorsäure ab, wodurch 

 zu Mißverständnissen in bezug auf Bestimmung der Phosphorsäure, die 

 auch aus Nukleinsäuren und Nukleoproteiden stammt, Veranlassung ge- 

 geben ist. Man darf jedenfalls solche Präparate allein nicht für stichhaltig 

 ansehen. Man muß sich vielmehr noch einer anderen, und zwar der fol- 

 genden Methode bedienen : Gefrorene Schnitte von frischem Gewebe werden 

 vier oder fünf Stunden lang in absolutem Alkohol belassen, dann dieselbe 

 Zeitdauer in Äther, worauf sie zum allergrößten Teile, wenn nicht voll- 

 ständig, vom Lecithin befreit sind. Nun werden sie fiü" 1 — 3 Tage lang 

 bei 35*' C in das Salpetersäuremolyl)datreagens gelegt, darnach mit der 

 2"/üigen Phenylhydraziniösung behandelt, in Wasser gewaschen, in Alkohol 

 entwässert, in Xylol oder in Zedernöl geklärt und endlich in Balsam ein- 

 gebettet. 



