Arheitsmethodeii zur Untersuchung des intermediären Stoffwechsels. 1177 



In der eigentlichen Versuchsperiode wird das Fk'isch durch mög- 

 lichst weit aufgespaltenes Eiweiß ersetzt. Am besten gibt man dieses 

 in Form fermentativ aufgespaltenen Fleisches. Möglichst fett- 

 freies Pferdefleisch wird 6 Wochen lang mit Hundenmagensaft ver- 

 daut, dann die Reaktion durch Zusatz von NaHCO^ leicht alkalisch 

 gemacht und nunmehr Panki-eassaft, eventuell auch Pankreatin (Rhena- 

 nia) , zugegeben. Nach 14 Tagen setzt man noch ein Extrakt aus 

 Darmschleimhaut hinzu, bricht nach weiteren 4 Wochen die Verdau- 

 ung al) und filtriert. 1) Erfahrungsgemäß genügt diese Behandlung zur 

 beinahe völligen Aufspaltung. Um aber zu sicheren Versuchsresultaten zu 

 kommen, ist es nach Abderhalden durchaus notwendig, in jedem Falle 

 durch genaue Untersuchung des Verdauungsproduktes festzustellen, daß es 

 wirklich vollständig oder doch nahezu vollständig aufgespalten ist. Fehlen 

 der Biuretreaktion allein beweist das noch nicht. Kompliziertere Produkte 

 (Polypeptide) dürfen nur in so geringer Menge vorhanden sein, daß sie 

 zur Aufrechterhaltung des N-Gleichgewichtes keinesfalls ausreichen können. 



Die Kontrolle des Verdauungsproduktes geschieht am einfachsten 

 durch die Formoltitrationsmethode von Sörensen'^); man imtersucht, 

 ob die Menge der Aminosäuren in dem Verdauungsprodukt beim Kochen 

 mit Salzsäure noch zunimmt. 



5 g des trockenen Präparates werden in 100 cni^ Wasser gelöst. 



a) In 5 cm^ dieser Lösung wird der N-Gehalt nach Kjeldahl be- 

 stimmt. 



h) 25 cm^ derselben Lösung werden gegen Lackmuspapier möglichst 

 genau neutraUsiert und auf 200 cm -^ verdünnt. In AQ cm^ dieser Lösung 

 wird XH3 nach Krüger-Reich- Schittenhelm bestimmt, andere 40 cm^ zur 

 Formoltitrierung benutzt und so die Menge des Aminosäuren-N und NH3-N 

 bestimmt. 



c) Weitere 25 cm^ werden durch 6 Stunden langes Kochen mit 25 cm^ 

 konzentrierter Salzsäure hydrolysiert, die dunkelbraune Flüssigkeit aiü" dem 

 Wasserbade bis zur Trockene eingedampft; der Rückstand ^rird mit Wasser 

 in einen 100 cm^ Meßkolben gebracht, mit AgX()3 entfärbt, auf 100 cm^ 

 aufgefüllt und filtriert. Vom Filtrat werden 50 cm'^ in einem 100 an^-Kol- 

 ben genau gegen Lackmuspapier neutralisiert und bis zur Marke verdünnt. 

 Von dieser Lösung werden wieder 40 cm'' zur XH3 -Bestimmung. 40 cm'^ 

 zur Formoltitrierung verwendet. 



Die Menge des Aminosäuren-X muß bei h) und c) annähernd gleiche 

 Werte ergeben. 



^) Abderhalden und Olinger, Weiterer Beitrag zur Frage nach der Verwertung 

 von tief abgebautem Eiweiß im tierischen Organismus. 7. Mitteilung. Zeitschr. f. phys. 

 Chem. Bd. 57. S. 74 (1908). 



-) Henriques und Gjaldbäk, Über quantitative Bestimmung der im Protein oder 

 in dessen Abbauprodukten vorhandenen peptischen Bindungen. Zeitschr. f. physiol. Chem. 

 Bd. 67. S. 8 (1910). — Abderhalden und Rona, Weiterer Beitrag etc. 15. Mitt. Zeit- 

 schrift für physiol. Chemie. Bd. 67. S. 405 (1910). 



