Die Präzipitine und die Methoden der Präzipitation. 551 



Methode von Pfeiler: Nach Pfeiler wird das fragliche Seniin 

 unverdünnt auf den Boden der r///'"»//M^/'-Ivührchen gegossen und mit 

 dem Antigen üherschichtet. Letzteres ist ein Extrakt von Rotzbazillen, der 

 mit normalem Pferdeserum verdünnt ist, das ..Reagierserum". Das zur 

 Herstellung des Reagierserums erforderliche ..\'erdünnungsserum" darf an 

 und für sich, über artgleiches Serum geschichtet, keine Ringbildung ein- 

 treten lassen. 



Pfeiler empfiehlt ..in Karbolkochsalzlösung oder karbolisiertem Pferde- 

 serum hergestellte, filtrierte (ungebrauchte is'ei^-Ae'Mverzen ; mehrmals ge- 

 brauchte halten die Präzipitinogene zurück) Rotzbazillenextrakte zu ver- 

 wenden. Die Wirksamkeit dieser Extrakte hängt von ihrer Konzentration 

 ab. Gut bewachsene Kollesche Schalen werden mit 40 — 50 cm^ Karbol- 

 kochsalzlösung oder karbolisiertem Pferdeserum abgeschwemmt. Der filtrierte 

 Schüttelextrakt wird mit der 6 — 12fachen Menge nicht zu alten unkarboli- 

 sierten Pferdeserums kurz vor dem Versuch verdünnt. JJm dieses Reagier- 

 serum spezifisch leichter zu machen als die Proben, welche untersucht 

 werden sollen, fügt er auf 1 cm» Extrakt 1 c/^^^ j^^ochsalzlösung hinzu. Das 

 Reagierserum trübt sich kurze Zeit nach der Mischung ( Normalpräzipitation). 

 Das \'erfahren selbst gestaltet sich folgendermaßen: Es werden von jeder 

 Serumprobe je O'o crn^ des nicht inaktivierten zu prüfenden Serums in 

 zwei t7?/e>J??/Y//-Röhrchen gefüllt. Darauf läßt man aus einer Pipette mit 

 Vioo t''«^-Einteilung zunächst in ein Röhrchen (Prüfungsröhrchen) an die 

 Innenfläche des oberen Randes des Röhrchens 0*04 — O'Oö cm^ des Reagier- 

 serums laufen. Man verschließt nun die obere Öffnung der Pipette so 

 lange, bis der herunterlaufende Tropfen die Oberfläche des zu unter- 

 suchenden Serums erreicht hat. Erst dann wird wieder geöffnet. Langsam 

 läßt man weitere 0"26 cm'^ des Reagierserums an der Wand des Röhrchens 

 auf das Serum fließen. Bei dieser Vorsicht wird das untere Serum kaum 

 aufgewirbelt. Das Reagierserum schichtet sich scharf abgegrenzt auf das 

 untere. Das zweite VhlenhHth-?\ö\v\:c\\eii wird in der gleichen Weise über- 

 schichtet, jedoch mit einem Gemisch von 2 Teilen Kochsalzlöimg und 

 6 — 12 Teilen des Verdünnungsserums. Nur gut geschichtete Proben sind 

 zu untersuchen. Man sieht in den Röhrchen dann oben eine schwach trübe, 

 etwas graue, unten eine klare Serumschicht, die durch eine farblose, 

 scheibenförmige Zone, voneinander getrennt sind. Diese Zone ist das Merk- 

 mal der Reaktion und ist zu beobachten. Stark präzipitinhaltige Sera 

 reagieren momentan (1 — 10 Minuten) durch die Bildung eines kräftigen 

 grauen Ringes an der Berührungsstelle beider Sera. Die Proben werden 

 bei Zimmertemperatur gehalten. Nach spätestens 1 Stunde muß das Er- 

 gebnis abgelesen werden. Nach dieser Zeit können auch Normalringe auf- 

 getreten sein. Den zeitlichen Abschluß der Reaktion stellt man am besten 

 so fest, daß man zunächst ein oder mehrere durch einen hohen Normal- 

 präzipitingehalt ausgezeichnete Kontrollsera von nichtrotzigen Pferden über- 

 schichtet. Darauf erfolgt die Schichtung der neu zu untersuchenden Proben 

 und nach 10 Minuten die der rotzigen Kontrollsera. Sind unter den zu 



