Mikroskopische Tecluiik. 705 



Für die Knorhoiilakunen und ihre Ausläufer benutzte man 

 früher Schliffe unentkalkten Knochens, welche man in Alaunlösung einlegte, 

 wobei frei werdende Kohlensäure in die Lakuuen und Kanälchen eindringt 

 (nach V. BeckHnghansen). Jetzt stehen zwei vorzügliche Methoden von 

 Schmorl zur A'erfügung'. Die erste dieser, welche sicherer zu sein scheint, 

 soll hier wiedergegeben werden. 



Schniorlsche Methode. 



Man fixiert kleine Knochenstückchen am besten in Formol, härtet 

 6 — 8 Wochen in Miillerscher Flüssigkeit nach, wäscht 24 Stunden in 

 AYasser ab, entkalkt, am besten mittelst Ehneri>c\\er alkoholischer Salzsäure- 

 lösung- (dann ist das vorherige AVässern überflüssig), härtet nach sorg- 

 fältigem Wässern in steigendem Alkohol nach und bettet ein oder stellt 

 Gefrierschnitte her. Dünne Schnitte werden mindestens 10 Minuten in 

 Wasser eingelegt und dann am besten in folgender ammoniakalischer 

 Thioninlösung- gefärbt : 



Konzentrierte Lösung von Thionin 



in öO^/oigem Alkohol 1 an^, 



Aqua dest 10 „ ; 



Li([Uor ammonii caust 2 Tropfen. 



Die Schnitte werden sodann gewässert, 1 — 2 Minuten in Alkohol 

 übertragen, wieder gewässert und gelangen mit Glasnadeln für einige Se- 

 kunden oder länger in gesättigte wässerige Lösung von Phosphorwolfram- 

 säure. Sodann werden die Schnitte mindestens ö — 10 Minuten, bis sie einen 

 himmelblauen Ton haben, gewässert und die Färbung in 20Voigem Formol 

 1 — 2 Stunden oder in Liquor ammonii caust. 10 cm^, Wasser 100 cmK 5 Mi- 

 nuten fixiert. Sodann werden die Schnitte in einmal zu wechselnden 90%igen 

 Alkohol übertragen, dann zur Entwässerung in Oö'' oigen oder absoluten 

 Alkohol, zur Aufhellung in Xylol oder Karbokylol (kurz) und in Balsam 

 eingeschlossen. Ist die Grundsubstanz zu dunkel gefärbt, so kann man 

 nach der Fixierung etwa 3 — 5 Minuten in Salzsäurealkohol differenzieren, 

 eventuell kann man dann zellige Elemente noch mit Hämatoxylin nach- 

 färben. 



Bei dieser M'ethode sind Knochenhöhlen und ihre Ausläufer blau- 

 schwarz. Zellen, besonders Kerne, blau gefärbt. Die Grundsubstanz ist bei 

 Fixierung der Färbung in Formol hellblau, bei Fixierung in Ammoniak 

 farblos bis grünblau, bei letzerer, wenn in 2Iüllerscher Flüssigkeit gehärtet 

 worden war, rot dargestellt. Färbt man statt mit der obigen Farblösung nach 

 Entkalkung in wässeriger Salpetersäure ^/^ — V2 Stunde in konzentrierter 

 wässeriger Thioninlösung. welche zur Hälfte mit Wasser verdünnt wird 

 und überträgt die Schnitte nach der Phosphorwolfram säurebehandlung in 

 fließendes Wasser auf 2 Stmiden oder länger und sodann 1 — 2 Stunden 

 in 5°/oige Lösung von Kalialaun in Aijua dest., wässert dann, entwässert 



Abderhalden. Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. VII. ^^ 



