Nachweis und Bestimmung der biologisch wichtigen Säuren. 25 



liniit ihre Auffindung', wenn man die Umwandlung in das Ammonsalz durch 

 Ammoniumphosphat bewirkt, indem man zu der mit Ammoniak auf ein 

 kleines \'olumen eingedampfen Flüssigkeit vor Zugabe des Zinkstaubs einige 

 Kristalle von phosphorsaurem Amnion fügt. 



Ebenso läßt sich der Nachweis der Bernsteinsäure in Niederschlägen 

 (Silbersalz) führen, indem man unbekümmert um etwaige feste Ausschei- 

 dungen genau nach der gegebenen Vorschrift verfährt. 



Albumin, Hämin- und Indolderivate geben auch die Pyrrolreaktion. 

 Über die Trennung der Bernsteinsäure von ihnen durch ihre Extraktion 

 mit Äther vergleiche man das Original. 



Bestimmung der Bernsteinsäure. 

 1. In Abwesenheit von Wein- und Apfelsäure 



kann man auf verhältnismäßig einfache Weise verfahren, i) Nachdem man 

 den Alkohol und die flüchtigen Säuren durch Wasserdampfdestillation ver- 

 jagt hat, wird der Rückstand auf dem W\asserdampf stark eingedampft, 

 kräftig mit Salpetersäure angesäuert und zur Extraktion der Bernsteinsäure 

 neunmal mit 86%i"'^iii Alkohol dreiviertel Stunden am Bückflußkühler aus- 

 gekocht. Die alkoholische Lösung wird sodann mit Kalkmilch im t'berschuß 

 erhitzt und nach dem Erkalten filtriert. Zur Bernsteinsäurebestimmung 

 wäscht man den Niederschlag mit 86Voigem Alkohol, löst in Salpetersäure 

 und extrahiert erschöpfend im Scheidetrichter mit einem Gemisch von 

 1 Teil 86 Voigem Alkohol und 1 1/2 Teilen Äther. Nach Verjagen der Lösungs- 

 mittel wird der Bückstand mit Kalilauge genau neutralisiert und das bern- 

 steinsaure Silber mit Silbernitrat ausgefällt. Das bernsteinsaure Silber, 

 welches nachweislich noch mit etwas Silberchlorid, etwas Silber und Spuren 

 von Silberphosphat verunreinigt ist, wird auf getrocknetem Filter gewogen, 

 zur Kontrolle kann man den Niederschlag im Porzellantiegel veraschen und 

 die Reinheit des gewogenen bernsteinsauren Silbers durch Wägung des 

 metallischen Silbers kontrollieren. 



Bei Zusatz von 0-7 g Bernsteinsäure zu einem Hefepreßsaft wurden auf 

 die geschilderte Weise 0-5 g als bernsteinsaures Silber gewogene Bernstein- 

 säure wiedergefunden. Die Genauigkeit der Methode ist daher eine geringe. 



2. In Gegenwart von Wein- und Äpfelsäure. 



Für die Bestimmung der Bernsteinsäure besitzen wir eine zwar weit 



umständlichere, dafür aber genauere Methode 2), die auch in Gegenwart 



anderer nichtflüchtiger Säuren, wie Wein-, Äpfel- und Milchsäure, zum Ziele 



führt, die die Anwendung obiger abgekürzter Methode unmöglich macht. 



1) Büchner und Rapp, Alkoholische Gärung ohne Hefezellen. Ber. d. Deutschen 

 ehem. Gesellsch. Jg. 34. S. 1528 (1901). 



-) R.Kunz, Bestimmung der Bernsteinsäure im Wein, nebst Bemerkungen über 

 die Bestimmung der Äpfelsäure und der Milchsäure im Wein. Zeitsclir. f. die Unters. 

 d. Nahrungs- u. Genußm. Bd. 6. S. 721 (1903). 



