Nachweis, Darstellung und quantitative Bestimmung des Glykogens. IQ\ 



4 Teilen absoluter Alkohol und 1 Teil offizineller Jodtiiiktur mit iiaclifoliion- 

 der Aufhellung- und Konservierung in Origanumöl. 



IL Färbung durch einen Farbstoff. 



a) Nach Be.<it. Einbettung in Celloidin , Färbung der Schnitte mit 

 Hämatoxylin-Delafield, Auswaschen in Wasser, Färbung mit Karmin (Kar- 

 min O';"), Amnion, chlorat. l'O, Lithium carb. 0-2, Aqua dest. ÖO^O), 15 bis 

 30 Minuten langes Eiidegen in eine Lösung, enthaltend 2 Teile absoluten 

 Alkohol und 1 Teil Liciuor ammon. caust., hierauf Auswaschen in Alkohol 

 von 70", Entwässerung in absolutem Alkohol, Aufhellung in Xylol und Ein- 

 bettung in Kanadabalsam. 



b) Nach Luhursch. Härtung in absohitcm Alkohol. \orf;irbung der 

 Schnitte mit salzsaurem alkohoUschem Karmin, darauf Färbung mit einer 

 konzentrierten Anihnwassergentianaviolettlösung, 2 — 4 ^limiten lang. Man 

 benutzt dazu 2 Stammlösungen, die sehr haltbar sind, und zwar Lösung I : 

 absoluter Alkohol 33'0, Anihnöl 9-0, Gentianaviolett im Überschuß: Lö- 

 sung II: konzentrierte Avässerige Gentiaua\iolettlösung. 



Von diesen Lösungen mischt man zum Gebrauch o Teile von I, mit 

 17 Teilen von IL Kurzes Abspülen der Schnitte in Wasser, hierauf kurzes 

 (ca. 15 Sekunden) Abspülen in 6rraAaw/scher Jodjodkaliumlösung und 

 gründhches Abtrocknen der Schnitte mit Fließpapier. Entfärben mit Ani- 

 linölxylol (2 : 1) und nachträgliches gründliches Entfernen des Anilinöls 

 durch Xylol. Einbetten in Kanadabalsain. Das Glykogen ist dunkelblau 

 bis ^^olett gefärbt. 



2. Chemischer (qualitativer) Nachweis.') 



Zu demselben dient die zuerst von Claude Bernard angegebene Jod- 

 reaktion. Je nach der Konzentration der Glykogenlösung schwankt der 

 Farbenton von blassem Gelbbraun durch Rotbraun bis zum tiefen Rot. Die 

 Reaktion ist am empfindlichsten, wemi in der Lösung weder freie Säure 

 noch Alkohol vorhanden sind. 



Nach Pflügers Vorschrift verfährt man am besten in der Weise, daß 

 man von zwei Reagenzgläsern gleichen Kalibers eins mit Wasser, das 

 andere mit der gleichen Menge der auf Glykogen zu untersuchenden Flüssig- 

 keit beschickt und dann in jedes aus einer Bürette je einen Tropfen einer 

 konzentrierten Jodlösung von etwa 3Vo f'^U^"" l'»''^- ^^i'hit^t "lan beide 

 Reagenzgläser gleichzeitig, gleich stark und gleich lang, so verschwindet 

 der vorher vorhandene Farbenunterschied vollkommen, um beim Al)kühk'n 

 in der Jodgiykogenlösung wieder zurückzukehren. 



Benutzt man anstatt, wie im vorhergehenden angenommen, einer 

 Lösung von chemisch reinem Glykogen die neutralen Extrakte von Organen, 

 so zeigt sich, daß auch nach Zusatz der Jodlösung zu der Glykogenlösung 

 die Braunfärbung bei ruhigem Stehen in der Kälte verschwindet. Die 



M Pflügcr, Das Glykogen. 2. Aufl. 1905. S. 18ff. 



Abderhalden, Handbuch der biochemischen Arboitsniethoden. II. 11 



