Nachweis, Darstellung und (luaiititative Bestimmung des Glykogens. 16:-^ 



dtirchsichtige Filtrat wird nach Pßüger-Nerking behandelt, indem zu 800 g 

 Lösunsi' 80.^/ JK, 40 cm^ Kalilauge von 60%, 400 cm ^ Alkohol von 96Vo 

 zugesetzt werden. Nachdem das Glykogen sich abgesetzt hat, wird die 

 klare Flüssigkeit abgesaugt, durch ein schwedisches Filter filtriert und das 

 Glykogen mit folgender Lösung gewaschen: lOOOcms Wasser, 100 .y JK, 

 bOcm^' Kahlauge von 60% und 500 cm » Alkohol von 96 V«- 



Das auf dem Filter befindliche Glykogen wird Aneder in abgekochtem 

 heißem Wasser gelöst und abermals mit JK, KOH und Alkohol in derselben 

 Weise wie vorher gefäUt und gereinigt. Dann Anrd das Präparat zur Beseiti- 

 gung von JK und KOH in Wasser gelöst und mit 1 Yolum OeVoigem 

 Alkohol gefällt, abfiltriert, mit 66"/oigem und 96Voigem Alkohol gewaschen. 



Das so erhaltene Präparat wird mit einer kleinen Menge Lauge von 

 /iOVo KOH eine Stunde lang in einem Kolben auf dem kochenden Wasser- 

 bade erhitzt. Nach Abkühlung wird die Lösung mit dem gleichen Volumen 

 Wasser versetzt und mit einem Volumen Alkohol von 96Vo gefällt. Nach 

 der Filtration wird der Niederschlag gewaschen mit einer Lösung, bestehend 

 aus 1 Volum KOH von L5Vq uud einem Volum Alkohol von 96Vo : «hinn 

 2mal mit 66<'/oigem, 96Voigem und schließlich absolutem Alkoliol und 

 Äther gewaschen. 



Jetzt werden 5 — 6 Fällungen mit einem oder zwei Volumen Alkohol 

 vorgenommen, um das Präparat von KOH zu reinigen. Durch Zusatz von 

 einigen Tropfen Phenolphtalein oder von Eosolsäure wird der abtropfende 

 Alkohol auf die Abwesenheit von KOH geprüft. 



Das Glykogen wird in Wasser gelöst und der Lösung eine kleine 

 Menge Essigsäure zugesetzt, darauf >nrd mit 1 Volum 96V„igem Alkohol 

 gefällt, die Flüssigkeit abgesaugt, filtriert und das Glykogen mit .Ukohol 

 gewaschen. Diese Pieinigung mit Essigsäure geschieht ;-)mal. 



Zur Entfernung der Essigsäure wird das (ilykogeu :> — 4mal mit 

 Alkohol gefällt, zuletzt mit säurefreiem Alkohol. Weil das Glykogen mit 

 zunehmender Pieinheit immer schwieriger durch Alkohol gefällt wird, dürfen 

 die wässerigen Lösungen nicht zu verdünnt sein. Das schneeweiße Präparat 

 wird 2 Tage konstant mit absolutem Alkohol in folgemler Weise gewaschen: 

 Man verschließt das Abflußrohr des Trichters mit einem Gummischlauch 

 und einer Klemme, gießt Alkohol auf das Glykogen und läßt denselben 

 nach einigen Stunden abfUeßen. Ebenso wird das Glykogen mit Äther 

 i\ Tage lang gewaschen. Es zerfäUt dann auf dem Filter in Stücke. Es 

 wird dann über Chlorcalcium oder Phosphorsäureanhydrid (nicht über 

 Schwefelsäure) in einen Exsikkator gesteht, den mau evakuiert. Konstantes 

 Gewicht erzielt man durch 2tägiges Trocknen bei 100» C. 



Neuerdings stellt Fflügcr reine Glykogenlösung in folgender Weise 

 dar'): Von dem durch Zerldeinerung in der Fleischhackraaschine gewonnenen 

 Organbrei werden 500 r/ mit 500 cm » 60%iger Kalilauge )3 Stunden lang 



1) W. Grehe, Kritische Untersuchungen iiher die quantitative Analyse des Glykogens. 

 Pflüyers Archiv. Bd. 121. 8. ()Ü9 (1908). 



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