]^(34 ^^^^'^ Grube. 



im siedoiidon Wasserbade erhitzt. V4 — V2 Stunde nach Bei^inn des Erhitzens 

 wird der Kolben herausgenommen und tüchtig umgeschüttelt, damit der 

 Fleischbrei sich mit der Kalilauge gut vermischt. Nach dem Abkühlen wird 

 auf 2 l aufgefüllt, gut gemischt und 4 l Oö^/oigei' Alkohol zugesetzt, l'm 

 eine bessere Ausscheidung des- Glykogens zu bewirken, setzt man ca. 100 cm» 

 einer gesättigten Kochsalzlösung zu und läßt über Nacht stehen. Die klare 

 Flüssigkeit wird vorsichtig abgegossen und der Glykogenniederschlag auf 

 ein schwedisches Filter gebracht. Der Brei wird mehrere Male mit GOVoigP»^ 

 Alkohol gewaschen, bis das Filtrat mögüchst farblos ist. Dann wird mehrere 

 Male mit Alkohol von 96%, dann ebenfalls mehrere Male mit Äther und 

 schließlich \\ieder mit absolutem iVlkohol gewaschen. Das auf dem Filter 

 und in den Bechergläsern befindliche Glykogen wird dann mit heißem 

 Wasser in Lösung gebracht. Um den noch vorhandenen Farbstoff ganz zu 

 entfernen, werden zu je 150 cw» Glykogenlösung 2 cm^ rauchender Salz- 

 säure vom spezifischen Gewicht 119 zugesetzt, dann mehrere Male durch 

 schwedisches Filter filtriert und schließlich die Lösung neutralisiert. Die- 

 selbe enthält jetzt reines Glykogen von schneeweißem Aussehen. 



IV. Quantitative Analyse des Glykogens. 



Nachdem E. Pßilyer in den letzten Jahren durch umfangreiche Arl)eiten 

 die (luantitative Glykogenanalyse sichergestellt hat, haben die alten 

 Methoden der Analyse nur noch historische Bedeutung. Wer zuverlässig 

 arbeiten aaiII, darf sich daher nach der heutigen Sachlage nur der Pßügerschen 

 ]\Iethode bedienen, welche darum auch allein hier mitgeteilt wird, i) 



1. Aufschließung, Fällung und Isolierung des Glykogens. 



100 g des zu untersuchenden Organes, das zuvor in der Fleischhack- 

 maschine zerkleinert worden ist, werden zusammen mit 100 cm^ KaUlauge 

 von 60% (Kaliumhydrat la Merck) in ein Kölbchen aus böhmischem Glas 

 gebracht, gut umgeschüttelt und im kochenden Wasserbad o Stunden lang 

 erhitzt. Nach 74 — V2Stündigem Erhitzen wird noch einmal gut um- 

 geschüttelt, um eine gleichmäßige ^lischung zu erhalten. Die Mündung 

 des Kölbchens wird mit einem Uhrgläschen zugedeckt. Nach Ablauf der 

 3 Stunden läßt man abkühlen, bringt den Inhalt des Köll)chens in ein 

 Becherglas, verdünnt mit dem gleichen Volumen Wasser (200 cm^), so daß 

 die Lösung nun 15°/o KOH enthält. Ein Teil des zur Verdünnung 

 genommenen Wassers dient dazu, das Kölbchen voUständig rein auszu- 

 spülen. Man fällt nun mit dem doppelten Volum Alkohol von 95%. 



Man läßt den Niederschlag sich gut absetzen, weil dann die Filtration 

 schneller vor sich geht, doch soll man nicht länger als 24 Stunden stehen 

 lassen, weil sich sonst das Glykogen stärker mit Farbstoff inhibiert und 

 schwerer durch Auswaschen zu reiniuen ist. 



1) F. Fjlihicr, Das Glykogen. 2. Aufl. S. 104 ff. 1905. — Derselbe, Eine neue Me- 

 thode der Glykogenanalyse. PjUigers Archiv. Bd. 114. S. 242 ff. 1906. 



