166 Karl Grube. Nachweis, Darstellung etc. des Glykogens. 



befindlichen Lösvmg werden jetzt 20 cni^ Salzsäure vom spez. Gew. 1'19 zu- 

 gesetzt. Weil später nach der Invertierung die Lösung in dem Kolben 

 neutralisiert werden muß, darf derselbe nicht bis zur Marke gefüllt werden. 

 Die in ihm enthaltene Lösung enthält nahezu 2-2"/o CIH. 



Bei dem bisher beschriebenen Verfahren war von 100^ ()rganl)rei 

 ausgegangen worden. Hat man nicht so\iel zur \'ei-fägung, wenn z. B. 

 das Glykogen in einem sehr kleinen Organ oder nur in einem Teil eines 

 Organs bestimmt werden soll, so verfährt man folgendermaßen: Es handelte 

 sich nur um 10^ Substanz. Man bringt dieselben in einem kleinen Kölb- 

 chen zusammen mit 10 cm^ KOH-Lauge von 60"/o iii ^^^ kochende Wasser- 

 bad, erhitzt 3 Stunden und setzt nach Abkühlung 40 cm^ Wasser zu und 

 fällt mit 160 c;» 3 Alkohol. Im übrigen bleibt das Verfahren dasselbe wie 

 es oben beschrieben wurde, nur wird die zu invertierende Lösung später nicht 

 auf 500, sondern nur auf 100 oder 200 cm^ gebracht. Auf je 100 cm^ der neu- 

 tralisierten Glykogenlösung kommen ö cni'^ Salzsäure vom spez. Gew. Ii9. 



2. Bestimmung des Glykogens. 



a) Durch Polarisation. Die in der oben angegebenen Weise 

 hergestellte Glykogenlösung ist zur Polarisation geeignet. Nach Pßüger 

 hängt die Polarisierbarkeit nicht allein vom Prozentgehalt der Glykogen- 

 lösung ab, sondern auch von der Größe der Glykogenstäubchen. Pßüger 

 benutzte zu seinen Bestimmungen einen Poiarisationsapparat nach Landolt 

 mit oteiligem Polarisator nach Lippich mit geradsichtigem Spektroskop 

 und einer Ablesung von 0*0 P. Er macht besonders darauf aufmerksam, 

 daß bei jeder Bestimmung mindestens 10 Einstellungen zu machen und 

 daß die Angaben des Apparates mit Normalquarzplatten zu prüfen seien. 

 Auch soll man beim Vorhandensein einer hinreichend konzentrierten 

 Lösung zur Bestätigung des Drehwinkels noch eine halbe und A'iertel- 

 konzentration untersuchen. Die durch Polarisation erhalteneu Werte wurden 

 kontrolliert durch Titration der invertierten Lösung nach Fehhng-Soxhlet. 



h) Durch Titration nach voraufgegangener Invertierung 

 des Glykogens. Diese Bestimmung ist nach Pflüger die Methode, welche 

 am sichersten und genauesten zum Ziele führt, besonders wenn es sich 

 um die Feststellung kleiner Unterschiede in verschiedenen Organen oder 

 in verschiedenen Teilen desselben Organes handelt. 



Die 2-2"/o HCl enthaltende Glykogenlösung ^\^rd in ein kochendes 

 Wasserbad gebracht und die Mündung des Kolbens mit einem Uhrschälchen 

 zugedeckt. Nach Sstündigem Erhitzen läßt mau abkühlen. Man bringt 

 nun ein Stückchen Reagenzpapier hinein und läßt aus einer Bürette soviel 

 60"'/oige Kalilauge zufließen, daß die Lösung eben alkahsch wird. Man füllt 

 dann bis zur Marke mit Wasser auf und filtriert durch ein Faltenfilter. 

 Diese Lösung dient nun zur graviinetrisclien Bestimmung des Zuckei's 

 nach 'Pflüger (siehe S. 174 ff.). 



Um den Wert für (ilykogen zu erhalten, multiphziert mau ^Xvw 

 durch die gravinietrische Methode erhaltenen Wert mit 0-927. 



