Spaltung razeiiiischer Monosaccharide etc. 195 



wenige oder auch 1 cm^- genügen. Durch Zusatz von 0-2Vo Tohiol hindert 

 man die Entwicldung- unabgetöteter Zellen oder die von Frenidorganismen. 

 Man inkuhert bei 37° C. Da nach eigenen Beobachtungen die Spaltung- 

 nach 24 Stunden häufig- noch nicht zum Abschluß gekommen ist, muß 

 man mindestens 48 Stunden stehen lassen. 



Darstellung eines wässerigen Hefeauszuges. Zur Herstellung 

 eines wässerigen Hefeauszuges bedient man sich frisch gewaschener Hefe, 

 die mit dem fünffachen Gewicht an Wasser etwa 24 Stunden bei oT^C 

 im Bi-utraum stehen gelassen und (hnni filtriert wird. 



An Stelle der durch Chloroformzusatz oder Zerreiben mit Glaspulver 

 zu isolierenden Endoenzyme wird man sich jetzt eines nach dem Verfahren 

 von E. Buchner hergestellten Preßsaftes bedienen, den man in so geringer 

 Menge anwendet, daß er nur schwache, die Isoherung der Spaltungs- 

 produkte nicht inhibierende, Gärwirkung entfaltet. Nach eigenen Er- 

 fahrungen kann man die Herstellung solcher Preßsäfte zur Polysaccharid- 

 spaltung auch auf Schimmelpilze übertragen, die man sich auf steriler 

 Nährlösung in der genügenden Zahl von Erlenmeyerkolben selbst züchtet. 

 Die Blich iieri^che ^Methode sei hier beschrieben. 



Anhang. 



Herstellung von Pilzpreßsäften nach Buchner. i) 

 A. Hefepreßsaft. 



Die Darstellung des Hefepreßsaftes wurde ursprünglich zur Ein- 

 i'ichtung der zellfreien Gärung angegeben. Bekanntlich gehngt es ohne 

 die Zertrümmerung der Zelle nicht, der Hefe die Zymase durch Wasser- 

 extraktion zu entziehen, da dieses Enzym im ZeUsaft festgehalten wird. 

 Das Zerreißen der Zellen ist also die theoretisch Avichtige Grundlage 

 der Preßsaftdarstellung; die Trennung des Zellsaftes von den j\Iem- 

 branen ist nur experimentelles Beiwerk, das allerdings für das Gehngen 

 der hervorzurufenden emzymatischen Wirkungen von großer Bedeutung ist. 

 Wichtig ist vor allem , daß sich die Operation in verhältnismäßig kurzer 

 Zeit durchführen läßt, so daß die sich vermischenden Enzyme nicht ge- 

 nügend Zeit haben, um sich gegenseitig zu vernichten. Vor allem unter- 

 hegt bekanntlich die Zymase der Wirkung der proteolytischen Enzyme 

 des Preßsaftes. In allen Fällen muß man auch hier die EntAvicklung von 

 Fremdorganismen durch einen Zusatz von 0-2^0 Toluol hemmen, wenn man 

 den Saft im Brutzimmer zur Wirkung bringt. Größere Gaben von Toluol 

 sind zu vermeiden, da sie die Enzyme zu stark hemmen. 



1) E. Buchner, H. Buch/irr und J/. Hahn, Die Zymasegärung. Untersuchungeu 

 über den Inhalt der Hefezellen und die biologische Seite des Gärungsproblems. R. Olden- 

 bonrg, München und Berlin 1903. 



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