Darstelluug der Proteine der Tierwelt: Kristallisierbare Proteine. 343 



dem Hoppe- Sei/lerschen Verfahren durch partielle Koaiiulation des Oxyhämo- 

 giobins schädlich wirkt, so haben Ärthus 1 ) und unabhängig davon H. Frey ^) 

 vorgeschlagen, durch Dialyse der Blutfarbstofflösung gegen Alkohol den 

 Alkohol allmählich zuzuführen und dann auch nur soviel wie zur Erzeugung 

 der Kristalle unbedingt erforderlich ist. Dabei kann man auch die niedrigen 

 Temperaturen, die beim Hoppe-Seyler^Qh^^ Verfahren nötig sind, vermeiden 

 oder wenigstens einschränken. Eine genauere Vorschrift zur Darstellung 

 mittelst Dialyse findet man bei Schuurmanns-Stekhovcn. ^) Mit P/oigei' 

 Kochsalzlösung auf der Zentrifuge gewaschene Blutkörperchen werden 

 2 Stunden mit Asbestflocken gründlich geschüttelt. Der Blutfarbstoff löst 

 sich dann in der Salzlösung auf, indem die Stromata größtenteils an den 

 Asbestflocken ankleben und so durch Filtration entfernt werden können. 

 So kommt das Oxyhämogiobin gar nicht mit Äther in Berührung und 

 man erhält eine sehr konzentrierte Farbstofflösung. Dann wird die Blut- 

 farbstofflösung in einem Pergamentschlauch in 45Vo Alkohol in den Eis- 

 schrank gestellt. Sobald sich Oxyhämoglobinkristalle an der Dialysatorwand 

 absetzen (nach 24 — 40 Stunden), wird der Dialysatorinhalt in ein zyhn- 

 drisches Gefäß gebracht und darin im Eisschrank bis zum völligen Ablauf 

 der Kristallisation belassen. Zum Umkristallisieren werden die abfiltrierten 

 Kristalle bei 37" in möghchst wenig Wasser gelöst und die Lösung wieder 

 (im Eisschrank) gegen 450/0 Alkohol dialysiert. Dieses Dialysationsverfahren, 

 das offenbare Vorteile bietet, ist bisher nur in vereinzelten Fällen praktisch 

 benutzt worden. Elementaranalysen derartiger Kristallpräparate hegen über- 

 haupt noch nicht vor. 



C. Das Ammoniumsulfatverfahren. Für manche Blutarten läßt sich 

 auch die Aussalzung mit Ammoniumsulfat zur Darstellung von Kristallpräpa- 

 raten mit ^'orteil benutzen. Man kann nach diesem Verfahren insbesondere 

 aus Pferdeblut leicht große Massen Blutfarbstoffkristalle herstellen. Allerdings 

 hat dieses Verfahren den Nachteil, daß eine Umwandlung von Oxyhämogiobin 

 in Methämoglobin sich nicht vermeiden läßt. Für manche Untersuchungs- 

 zw^ecke ist das aber gleichgültig. Die ersten Vei'suche, Blutfarbstoff mit 

 Ammoniumsulfat kristallinisch darzustellen, ha-t Dittr ich ^) ausgeführt; später 

 hat Schulz ■') ein Verfahren genauer beschrieben, das sich im wesentlichen 

 mit den Vorschriften deckt , die Micko '>) später gegeben hat. l'ferdeblut, 



') M. Ärfluif;, Yerfalireu, welches gestattet, leicht nnd schnell Kristalle von Oxj-- 

 hämoglobin zu erhalten. Compt. reud. soc. hiol. T. 47. p. 68G (1895); sowie Zeitschr. f. 

 Biol. Bd. 34. S. 444-44G (1896). 



^) H. Frey, Beiträge zur Kenntnis der Blutkristalle. Diss. Würzburg 1894. S. 228. 



') SchKurmanns-Sfckhoren, Darstellung von kristallisiertem Oxyhämogiobin. Onderz. 

 Physiol. Labor. Utrecht. 4. Reeks. Bd. 1. S.67; ausführlich beschrieben in der Abhandlung 

 von Klareren. Zeitschr. f. physiol. Chem. Bd. 33. S. 296—297 (1901). 



*) P. Dittricli, Über methämoglobinbildende Gifte. Arch. f. exp. Path. u. Pharm. 

 Bd. 29. S. 247-281 (1891). 



^) Fr. N. Schulz, Die Eiweißkörper des Hiiraoglobins. Zeitschr. f. physiol. Chem. 

 Bd. 24. S. 449— 481 (1898). 



^) C. Micko, mitgeteilt von K. Spiro. Zeitschr. f. phvsiol. Chem. Bd. 28. S. 182 

 (1899). 



