Darstellung der Proteine der Tierwelt: Kristallisierbare Proteine. ;)-1.5 



kristallisierbarer Oxyhämoiilobine dienen. Hämoglobinkristalle werden 

 nach Nencki und Sieber ^) hergestellt, indem man Kristalle von Pferde- 

 oxyhämoglobin in lauwarmem Wasser löst und dann mit etwas faulendem 

 Blut versetzt und dann in einer Flasche mit doppelt durchl)ohrtem Stopfen, 

 der Zu- und Ableitungsrohr trcägt, durch einen Wasserstoffstrom von Luft 

 befreit. Während der Wasserstoff durchleitung werden die Leitungsröhren 

 zugeschmolzen und die Flasche dann 8 — 14 Tage lang bei 20 — 25° ge- 

 lassen. Die Bakterien verzehren während dieser Zeit den Sauerstoff, die 

 violettrote Lösung enthält nur reduziertes Hämoglobin. Man zieht über 

 das Ableitungsröhrchen dann einen Gummischlauch, der in abgekühlten 

 absoluten Alkohol eintaucht, öffnet die Spitze des Ableitungsrohres durch 

 Abbrechen und saugt durch abwechselndes Erwärmen und Abkühlen der 

 Flasche 2ö Volumprozente Alkohol zu der Hämoglol)inlösung. Nach 12- bis 

 24stündigem Stehen bei ö — 10" ist das reduzierte Hämoglol)in in schönen 

 glitzernden Tafeln und Prismen auskristalUsiert. Für Kohlenoxydhä- 

 moglobin gilt die gleiche Vorschrift wie für Oxyhämoglobin. Zur Über- 

 führung von Oxyhämoglobin in Kohlenoxydhämoglobin genügt wegen der 

 eintretenden festen Bindung das Durchleiten von CO durch eine genügend 

 konzentrierte ( )xyhämoglobinlösung. Das gleiche gilt für S t i c k o x y d- 

 hämoglobin. 



Zur Darstellung von Methämoglobin und Cyanhämoglobin (Cyanmethämo- 

 globin von Kobert) gibt v. Zeynek^) folgende Vorschriften: Eine möglichst 

 konzentrierte Lösung von kristallisiertem Pferdeoxyhämoglobin wurde mit 

 frisch bereiteter Lösung von rotem Blutlaugensalz, welches durch Um- 

 kristallisieren gereinigt war, und dann im Dunkeln aufbewahrt wurde, ver- 

 setzt, bis völlige Umsetzung in Methämoglobin erzielt war. iVus der ab- 

 gekühlten Lösung wird durch etwa 25''/o kalten Weingeistes das Methämo- 

 globin in der üblichen Weise kristallinisch abgeschieden. Die mit der 

 Zentrifuge abgetrennten Kristalle werden mit eiskaltem Wasser gewaschen, 

 ein- bis zweimal umkristallisiert und nun mit einer i^Voi^^n Blausäure- 

 lösung versetzt. Fast momentan löst sich der Kristallbrei auf den Zusatz 

 der Blausäure auf, gleichzeitig schlägt die rehbraune Farbe in Bot um, 

 welches dem einer Oxyhämoglobinlösung bis auf einen Stich in Gelbe gleicht. 

 Die so erhaltene Lösung wurde mit destilliertem Wasser so weit verdünnt, 

 bis der Farbstoffgehalt 25 — ;50"/o betrug, und dann mit ^'4 Volum ab- 

 gekühlten Alkohols versetzt. Es bedurfte meist einer Temperatur von — 10", 

 um in 1 — 2 Tagen eine reiche Ausscheidung mikroskopischer Kristalle von 

 Cyanhämoglobin zu erzielen. 



E. Kristallisation von Hämocyanin. Der im Blute von Octopus 

 vulgaris vorkommende kupferhaltige Eiweißkörper, dessen sauerstoffhaltige 



') M. Nencki und X Sicher, Venöse Hämoglobinkristalle. Ber. d. Deutschen Chem. 

 Gesellsch. Bd. 19. S. 128—130 (1886). 



2) R. V. Zeynelc, Über kristallisiertes Cyauhämoglobiu. Zeitschr. f. physiol. Chem. 

 Bd. 33. S. 426—450 (1901). 



