Darstelluug der Proteine der Tierwelt: Nicht kristallisierbare Proteine. ^85 



die saure Molke abgehebert. Das Kasein wird sofort mit 2 — 4Z destil- 

 liertem, schwach angesäuertem Wasser gewaschen und über einem Lein- 

 wandtuch gut abgepreßt. Der Rückstand wird in einer Reibschale mit 

 einer geringen Menge einer 1 — 2"/oi8en Ammoniaklösung gut verrieben. 

 Der dicke Brei wird alsdann mit derselben Ammoniaklösung auf 1000 bis 

 1500 cm^ aufgefüllt, wobei er allmähhch in Lösung geht. Hierbei scheidet 

 sich das Milchfett sehr vollständig an der Flüssigkeitsoberfläche ab und 

 wird leicht nach 24 Stunden abgerahmt. Durch Zusatz von 10 — 12 cm^ 

 Eisessig zur abgerahmten Lösung entsteht abermals eine Kaseinfällung-, 

 die noch 2 mal in der beschriebenen Weise in 1 — 2"/oigem NHg gelöst und 

 mit Essigsäure wieder gefällt wird. Schließlich wird die letzte Säurefällung 

 mit destilliertem Wasser auf Leinwand bis zur Neutrahtät der ablaufen- 

 den Flüssigkeit gewaschen , im Soxhletapparat gut mit Alkohol und Äther 

 erschöpft und an der Luft getrocknet. 



Die mehrfache UmfäUung aus schwach ammoniakahscher Lösung er- 

 höht ohne Zweifel die Kaseinreinheit und erleichtert auch das Entfernen 

 des Fettes, das sich in der ammoniakalischen Lösung leicht absetzt. 



Großes Gewicht ist auf eine ergiebige Ätherextraktion zur Ent- 

 fernung der letzten Fettspuren zu legen. Eine Kontrolle am Abdampfrück- 

 stand von Proben der p]xtraktionslösung ist immer geboten. Es sei ferner 

 betont, daß selbst die als Caseinum purissimum nach Hainmarsten (Merck) 

 im Handel befindlichen Präparate keineswegs absolut fettfrei sind ! Es muß 

 daher eine solche Ätherextraktion oft tagelang fortgesetzt werden. 



Darstellung von Kasein aus Frauenmilch nach Kobrak.'') 



Man versetzt die zentrifugierte Milch mit Yg ihres Volums Vio n-Essig- 

 säure und unterwirft diese Lösung 5 Tage lang im Pergamentschlauch der 

 Dialyse gegen täglich erneuertes Chloroformwasser. Nach dieser Zeit erst 

 hat sich das Kasein abgeschieden. Man zentrifugiert die Fällung aus, 

 wäscht sie auf einem Papierfilter gut mit schwach angesäuertem (Essig- 

 säure) Wasser, behandelt dann mit Alkohol und mit Äther und läßt eine 

 energische Ätherextraktion im Soxhletapparat nachfolgen. Schließlich trocknet 

 man im Vakuum. 



Die Elementaranalysen maximal gereinigter Kaseine ergaben folgende 

 Werte: 



G H N S P Vo 

 [ 52-96 7-05 15-65 0-758 0-847 Hammarsten. 

 Aus Kuhmilch: 15-45 0-75 0*77 Laqueur u. Snckur 



[ 50-0 7-07 15-91 0-82 0-84-0-89 Chittmden u. Painter. 

 Aus Frauenmilch: 52-24 7-;i2 14-97 1-12 0-68 Asche l«/o. 



Für Kuhmilch beträgt (7.)d — — 80" in neutraler, — 76" in alkalischer, 

 — 91" in salzsaurer Lösung. Long fand (a)i, = — 97-8 — UPS" in 

 Vio n-NaOH-Lösung. 



*) E. Kobrak, Beitrage zur Kenntnis des Kaseins der Frauenmilch. Fjliiffrrs Arcli 

 Bd. 80. S. 69 (1900). 



Abderhaldon, Handbuch der biochemischen Arbeitsinethodon. ]I. 25 



