Darstellung der Proteine der Tierwelt: Histone und Protamine. 44:0 



ausgeschleudert. Die abgesetzten Blutkörperchen werden noch einmal mit 

 0'9Voiger NaCl-Lösung aufgeschwemmt und zentrifugiert. 



Die gewaschenen Blutkörperchen werden je nach der Menge in 1 oder 

 2 Scheidetrichtern von je 2 l Inhalt eingebracht und in jedem mit 1500 cm» 

 Wasser von 40" geschüttelt. Nach einiger Zeit werden zu je löOOcm^ Wasser 

 500 cm 3 XaCl-Lösung von 3-6Vo hinzugefügt. Dann wird zentrifugiert. Die 

 abgesetzten Kernmassen werden von neuem in einem Scheidetrichter in 

 1500 cm 3 Wasser von 40" unter Umschütteln suspendiert. Nach Hinzufügen 

 von 500 cm 3 NaCl-Lösung von 3'6"/o wird wiederum zentrifugiert. 



Dies Vorgehen wird so oft wiederholt, bis die Masse ein farblos 

 glasiges Aussehen ohne rote Streifen hat und an die Kochsalzlösung keinen 

 Blutfarbstoff mehr abgibt. Dann wird die Kernmasse wiederum in Wasser 

 zum Aufquellen gebracht und mit dem doppelten Volumen Alkohol zur 

 Schrumpfung gebracht, zentrifugiert, in 96<'/oigen Alkohol gebracht, abge- 

 saugt, noch einmal mit Oß^/oigem Alkohol verrieben und aligesaugt, dann 

 in absolutem Alkohol und darauf in Äther getrocknet und abgesaugt. 



Die ganzen Manipulationen dürfen bis zum Einbringen in Alkohol 

 nicht mehr als :■> Tage in Anspruch nehmen. Es empfiehlt sich, die Kern- 

 massen nachts über nicht mit Wasser allein, sondern nach Zufügung der 

 NaCl-Lösung an einem kühlen Platze aufzubewahren. 



Darstellung von Histon aus den Kernen von Vogelblut- 

 körperchen nach Kossel.^) 



Die auf die eine oder andere Weise gewonnenen Kerne werden mit 

 0"87oiger Salzsäure extrahiert, filtriert und aus dem Filtrat das Histon 

 durch Eintragen von Steinsalz ausgefällt. Der reichlich entstehende Nieder- 

 schlag wird abfiltriert, mit salzhaltiger Säure ausgewaschen, in Wasser 

 aufgeschwemmt und nun der Dialyse unterworfen. In dem Maße, A\ie das 

 Salz durch Diffusion entfernt wird, geht die Substanz im Innern des Dia- 

 lysators in Lösung. Aus der neutralen salzfreien Lösung wird das Histon 

 durch vorsichtigen Zusatz von Ammoniak ausgefällt, abfiltriert und mit 

 Alkohol und Äther getrocknet. 



2. Histon aus der Thymusdrüse. 



Darstellung nach Kossei und Kutscher:-) 



Das feinzerhackte Thymusgewebe wird mit etwa der doppelten ^Nlenge 

 Wasser bei gewöhnücher Temperatur ausgezogen und das wässerige Extrakt 

 mit Salzsäure versetzt, bis der Gehalt an Salzsäure 0-8°/o beträgt. Der 

 Niederschlag wird durch Zentrifugieren und Filtrieren entfernt und das 



^) A. Kossei, Über einen peptonartigen Bestandteil des Zellkerns. Zeitschr. f. 

 physiol. Chemie. Bd. 8. S. 511 (1884). 



^) A. Kossei und Fr. Kutscher, Beiträge zur Kenntnis der Eiweißkörper. Zeitschr. 

 f. physiol. Chemie. Bd. 31. S. 188 (1900). 



