Darstellung der Proteine der Tierwelt: Histone und Protamine. 445 



Setzt man zu einer Hämosiiobinlösung eine sehr geringe Menge stark 

 verdünnter Salzsäure, so entsteht eine flockige, braune Fällung, die sich 

 im geringsten Überschuß von Säure sofort leicht löst. Die so erhaltene 

 Lösung zeigt nicht mehr die schöne rote Farbe der ursprünglichen Hämo- 

 globinlösung, sondern einen braunen Farbenton; jedoch wird dadurch nicht 

 nur die Lösung in ihrer Farbe verändert, sondern es ist auch eine kom- 

 plete Trennung zwischen Eiweiükörper und Farbstoff eingetreten. Setzt 

 man nämlich zu einer solchen Lösung, die eben sauer reagiert, Alkohol 

 (ca. Vs Vol.) und schüttelt nunmehr mit Äther aus, so tritt der ganze 

 Farbstoff in den Äther über, während die untenstehende, wässerig-alkoho- 

 lische völlig klare Lösung den entfärbten Eiweißkörper enthält. Diese Spal- 

 tung und Trennung vollzieht sich mit ganz überraschender Leichtigkeit, 

 wenn man einige Vorsichtsmaßregeln beobachtet. Zunächst muß die Hämo- 

 globinlösung salzfrei oder doch sehr salzarm sein. Verwendet man eine 

 salzreichere Lösung, so tritt, wenn man nicht außerordentlich vorsichtig 

 verfährt oder mit verdünnten Lösungen arbeitet, auf Säurezusatz nicht eine 

 vorübergehende, sondern eine bleibende, im Überschuß von Säure unlös- 

 liche Fällung auf. Diese bleibende Fällung erfolgt auch in salzfreien Lösungen, 

 wenn man, nachdem der zuerst sich bildende Niederschlag durch einen 

 sehr geringen Überschuß von Säure gelöst ist, nunmehr eine größere Menge 

 von Säure hinzusetzt. — Ein stärkerer Salzgehalt wirkt auch beim Aus- 

 schütteln der durch vorsichtigen Säurezusatz erhalteneuLösung mit Alkoholäther 

 störend. Die Trennung des Farbstoffes vom Eiweißkörper vollzieht sich zwar 

 auch hier glatt, aber der Eiweißkörper bleibt nicht in Lösung, sondern wird 

 ausgefällt und nunmehr durch die Einwirkung des Alkohols leicht koaguhert. 



In betreff des Ausschütteins mit Äther ist zu bemerken, dal) sich 

 die Trennung des Äthers von dem wässerigen Alkohol leicht und sehr glatt 

 vollzieht, wenn ein bestimmtes Verhältnis zwischen Wasser, Alkohol und 

 Äther besteht, welches man am besten in jedem Versuche ausprobiert. 

 Man setzt zunächst ca. \i),\o\. 80o/oigen Alkohols zu der Hämoglobinlösung 

 hinzu und versucht dann mit dem halben Volumen Äther auszuschütteln. 

 Scheidet sich die Ätherschicht nicht sofort nach dem Schütteln glatt ab, 

 so setzt man von neuem etwas Alkohol hinzu und versucht, ob sich nun- 

 mehr der Äther auch nach heftigem Schütteln sofort abscheidet. Ist dies 

 nicht der Fall, so setzt man so lange vorsichtig Alkohol hinzu, bis eine 

 rasche und glatte Abscheidung eintritt. Arbeitet man mit sehr konzen- 

 trierten Lösungen, so ist es zweckmäßig, wenn man kurze Zeit heftig 

 geschüttelt hat, den Äther zu erneuern. 



Man erhält so eine klare, mehr oder weniger i)raungelb gefärbte, 

 wässerig-alkoholische, schwach saui^e Lösung. Aus dieser fällt beim Neutra- 

 hsieren mit Ammoniak ein schwach gelb gefärbter, grobflockiger Nieder- 

 schlag aus, der sofort abgesaugt wird. Dann wird er in Wasser unter Zu- 

 satz einiger Tropfen Essigsäure gelöst und durch mehrtägiges Dialysieren 

 die Essigsäure entfernt : man erhält so eine völlig neutrale, absolut klare, 

 schwach gefärbte Globinlösung. 



