Isolierung von Histidin, Lysin und Arginin (Ornithin und Guanidin). 501 



Die Flüssigkeit wird nun mit Barytwasser genau neutralisiert, gelöstes 

 Baryumnitrat zugesetzt, solange noch die Entstehung eines Niederschlags 

 zu beobachten ist, filtriert und der Niederschlag bestens ausgewaschen. Das 

 Filtrat wird durch Eindampfen auf 300 cm^ geln-acht und in einem Koch- 

 kolben nach dem Ansäuern mit Salpetersäure mit einem kleinen Über- 

 schuß, d. h. so lange mit einer konzentriei'ten Lösung von Silbernitrat ver- 

 setzt, bis eine Tropfenprobe in Barytwasser einen braungelben Niederschlag 

 erzeugt. 



Ist dies erreicht, so wird mit Barytwasser nochmals schwach sauer 

 oder eben neutral gemacht, aufgeschwemmtes Baryumkarbonat zugesetzt, 

 die Flüssigkeit zunächst im Wasserbade angewärmt, dann auf dem Draht- 

 netz zum einmaligen Aufkochen erhitzt und zum Absetzen und Erkalten 

 beiseite gestellt. 



Der Histidinsilber haltende Niederschlag wird nun abfiltriert und 

 kalt mit schwach barythaltigem Wasser (5 — 6 Tropfen einer 5'Vüigen Ätz- 

 barytlösung auf 100 cin^ Wasser) bis zum Verschwinden der Salpeter- 

 säurereaktion sorgfältig ausgewaschen. Filtrat und Waschwasser werden 

 vereinigt und zur Argininbestimmung reserviert. 



Der argininfreie Niederschlag wird im Kolben mit schwefelsäure- 

 haltigem Wasser zur sauren Pveaktion erhitzt, mit Schwefelwasserstoff zer- 

 setzt, die Flüssigkeit zur Entfernung des Schwefelwasserstoffs gekocht, das 

 Schwefelsilber abfiltriert, wiederholt ausgekocht und mit siedendem Wasser 

 bis zum Verschwinden der Phosphorwolframsäurereaktion völhg erschöpft. 

 Filtrat und Waschwasser werden vereinigt und durch Eindampfen auf 

 250 cih'^ gebracht; alsdann wird in 25—50 cin^ der Stickstoff nach Kjeldahl 

 bestimmt. Aus dem durch diese Bestimmung gefundenen N-Wert wird das 

 Histidin berechnet. 



Der Best der Flüssigkeit wird mittelst Ätzbaryt heiß von der über- 

 schüssigen Schwefelsäure, durch Kohlensäure vom überschüssigen Baryt 

 befreit, eingedampft und vom ausgeschiedenen Baryumkarbonat und -sulfat 

 abfiltriert. Filtrat und Waschwasser des wiederholt heiß gewaschenen 

 Niederschlages werden vereinigt, nochmals eingedampft, nötigenfalls durch 

 wenige Tropfen verdünnter Schwefelsäure von den letzten Spuren Baryt 

 befreit und auf etwa 10 on^ gebracht. 



Diese Flüssigkeit dient zur genaueren Bestimmung des Histidins in 

 Form des gut kristallisierenden und schwerlöslichen Salzes mit Pikrolon- 

 säure, die von Steudel in die physiologische Chemie eingeführt Avorden ist. 

 Nach Maßgabe der vorher ausgeführten Kjeldahlbestimmung kann man 

 die Menge der zur Ausfällung erforderlichen Pikrolonsäure berechnen. 

 Man fügt einen geringen Überschuß der in wenig heißem Alkohol gelösten 

 Pikrolonsäure hinzu, saugt das entstandene Pikrolonat nach ?> Tagen ab, 

 wäscht es mit wenig Wasser aus, trocknet bei 100" und bringt es zur 

 Wägung. Das Histidin ist nach der Formel CioHgNiOg . CgHgNs O, aus 

 dem Pikrolonat zu berechnen. 



