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und größere Mengen komplizierter gebaute Produkte oder umgekehrt \\e\e 

 Aminosäuren, wenn die Hydrolyse eine vollständigere ist. Hat man zur 

 Hydroh-se Schwefelsäure gewählt, so wird diese quantitativ mit Baryt 

 ontfernt. Ist die Hydrolyse durch Salzsäure herbeigeführt worden, so wird 

 deren Hauptmenge mit Kupferoxydul gebunden. Es lohnt sich in beiden 

 Fällen, das ganze Gemisch von Spaltungsprodukten mit Phosphorwolfram- 

 säure zu fällen und das Filtrat des Niederschlages für sich zu untersuchen. 

 Es gehngt so bis zu einem gewissen Grade, die komplizierteren Produkte 

 von den einfacheren zu trennen. Der Phosphorwolframsäureniederschlag 

 wird mit Baryt zerlegt und aus dem Filtrat der Phosphorwolframsäure- 

 fällung wird der Überschuß des Fällungsmittels mit Baryt, und dessen 

 Überschuß mit Schwefelsäure genau entfernt. Zur weiteren Trennung der 

 Abbauprodukte wird die Estermethode angewandt, und zwar wird die Ver- 

 esterung in genau derselben Weise durchgeführt, wie es bei der Isolierung 

 der Aminosäuren geschildert worden ist, mit der Ausnahme, daß hier die 

 gasförmige, trockene Salzsäure unter Kühlung eingeleitet wird. Mit ganz 

 besonders großer Sorgfalt wird jede höhere Temperatur auch l)eim Ein- 

 dampfen der alkohohschen , die Esterchlorhydrate der Alibauprodukte ent- 

 haltenden Lösung ausgeschlossen. Das Verdampfen erfolgt bei 10 — Ibmm 

 Druck und einer 40" nicht übersteigenden Temperatur des Wasserbades, 

 aus dem destilliert wird. Die Veresterung wird wiederholt, und schließlich 

 werden die Ester mit der auf den Chlorgehalt berechneten Menge Natrium, 

 gelöst in Alkohol, in Freiheit gesetzt, und die Ester destilliert, und zwar 

 bis 100*^ des Wasserbades. Es gehen hierbei die Ester der Monoamino- 

 säuren über, während die Ester der komplizierteren Spaltprodukte und 

 vor allem auch die Dipeptidester nicht destillieren. Um noch die erst bei 

 höherer Temperatur siedenden Aminosäureester zu entfernen, wird der 

 Destillationsrückstand mit trockenem Äther ausgeschüttelt, und dann der 

 ungelöste lUickstand in Alkohol gelöst. Beim Stehen scheiden sich bald 

 aus dem Alkohol Substanzen ab . zum Teil in kristallisiertem, zum Teil in 

 amorphem Zustand. Es sind dies die Anhydride, die sich aus den Dipeptid- 

 estern bilden. Ihre Entstehung kann durch Erwärmen der Lösung und vor 

 allem durch Einleiten von Ammoniak beschleunigt werden. Im allgemeinen 

 empfiehlt es sich, die Anhydride durch einfaches Stehenlassen zur Ab- 

 scheidung zu bringen. 



Auf diesem Wege gelingt es, die einfachen Aminosäuren, die Dipeptide 

 und die komplizierter gebauten Produkte zu trennen. Durch eingehende 

 Kontrollversuche wurde die Bildung der beobachteten Anhydride aus den 

 Aminosäureestern ausgeschlossen. Sie stammen unzweifelhaft von im Hydro- 

 lysat vorhandenen Dipeptiden. 



Die eben geschilderte Methode zum Nachweis von Polypeptiden hat 

 zwei Nachteile. Einmal ist sie nur auf Dipeptide anwendbar und dann 

 ergibt sie nicht, welches Dipeptid in Wirklichkeit bei der Hydrolyse ent- 

 standen ist. Wird z. B. Glycyl-d-alaninanhydrid isoliert, so bleibt die Frage 

 offen, ob dieses aus Glycyl-d-alanin oder aus d-Alanyl-glycin entstanden ist. 



