Isolierung von Peptonen. 537 



gerührt bzw. umgeschüttelt. Täglich werden 10 — 15 cm^ Toluol und 5 bis 

 10 cm^ Chloroform zugegeben. Nach 6tägiger Verdauung werden noch 3 g 

 Trypsin zugegeben. Im ganzen wird etwa 9 Tage verdaut. 



B. Isolierung des Peptons. 



In die Yerdauungslösung werden 15 ä:^ Ammonsulfat eingerührt; es 

 wird ca. 15 Stunden bei Körpertemperatur bis zur Auflösung des Ammonsul- 

 fates und zum Zusammenballen der Albumosen weiter gerührt. Nach Erkalten 

 wird von ausgeschiedenen Albumosen abgeseiht, der Albumosenniederschlag 

 abgepreßt. Das durch Filtrieren durch Papier klar erhaltene Filtrat wird 

 nach Beispiel I von Albumosen befreit und weiter verarbeitet. Aus dem 

 nach Beispiel I umgefällten Eisenniederschlage I erhält man das Trypsin- 

 fibrinpepton ß. Zur Ausfällung des Eisenniederschlages I sind 200 g Ferri- 

 ammonsuLfat verbraucht worden. 



Die Zivisclienfällung. 



Um die letzten Beste des Trvpsinfibrinpeptons ß zu entfernen, wird 

 das Filtrat vom Eisenniederschlage I mit ammonsulfatgesättigtem Ammoniak 

 neutralisiert und in dasselbe 20 g Ferriammonsulfat eingerührt. Hierauf 

 wird mit amjjionsulfatgesättigtem Ammoniak neutralisiert und von dem 

 Eisenniederschlage, der verworfen wird, filtriert. 



Der Eisenniederschlag II. 



In das Filtrat der ZwischenfäUung wird solange abwechselnd feinge- 

 pulvertes Ferriammonsulfat verrührt und ammonsulfatgesättigtes Ammoniak 

 zugefügt, bis eine Probe des Filtrates nur noch eine schwache Biuret- 

 reaktion gibt. Es werden ca. 1100 g Ferriammonsulfat gebraucht. Der 

 Niederschlag wird auf glattem Filter filtriert, dann abgenutscht, 4mal mit 

 gesättigter Ammonsulfatlösung gedeckt, mit ca. 3 l gesättigter Ammon- 

 sulfatlösung verrieben. Durch Zusatz einer Mischung von 330 cm^ gesättigter 

 Ammonsulfatlösung und 170 cm^ konzentrierter Schwefelsäure unter Um- 

 rühren wird der Niederschlag gelöst und durch Neutrahsation mit ammon- 

 sulfatgesättigtem Ammoniak unter kräftigem Motorrühren der Niederschlag 

 gefällt. Der Niederschlag wird filtriert, genutscht, 4mal mit gesättigter 

 Ammonsulfatlösung gedeckt, von der Nutsche heruntergenommen, mit 

 Ammonsulfatlösung verrieben, ^^ieder abgesaugt, 3mal mit gesättigter 

 Ammonsulfatlösung gedeckt. Der scharf abgesaugte Niederschlag wird mit 

 ca. 2 l Wasser verrieben, unter Rühren durch allmähUchen Zusatz von 

 ca. 800 cm 3 20'>/oi8er Schwefelsäure gelöst. In die Flüssigkeit wird bei 

 18 bis 200 solange feingepulvertes Barythydrat eingetragen, bis ein geringer 

 Überschuß desselben vorhanden ist. Zuletzt wird auf 40" erwärmt. Der 

 Niederschlag wird abgesaugt, mit Wasser ausgewaschen, von der Nutsche 

 heruntergenommen, verrührt, wieder abgenutscht und mit Wasser ausge- 

 waschen. Das mit den Waschwässern vereinigte Filtrat wird mit Ammon- 

 karbonatlösung von der geringen Menge überschüssigen Barytes befreit. 



