562 Felix Ehrlich. 



I. Spaltung durch Pilzkultur. ^) 



Als -Pilzmaterial verwendet mau vorteilhaft Schimmelpilze, besonders 

 Penicillium glaucum und Aspergillus niger, sowie Hefepilze, untergärige 

 und obergärige Bierhefe, in Reinkulturen. 



Bei Ausführung der Methode sind im übrigen hinsichtlich der Steri- 

 lisierung der Gefäße und Lösungen alle bei bakteriologischen Arbeiten üb- 

 lichen Vorsichtsmaßregeln zu beachten. 



Die Spaltung der Aminosäure wird am besten in einem Pastem-schen 

 Kolben oder noch einfacher in Jenenser Stehkolben vorgenommen, die 

 nach gründlicher Reinigung mit einem Wattebausch verschlossen und vor 

 dem Einbringen der Lösungen zunächst einige Zeit auf 160" erhitzt werden. 



Die betreffende razemische Aminosäure löst man in einer Konzen- 

 tration von ca. og in \W destilliertem Wasser eventuell unter Kochen 

 und fügt zu der abgekühlten Lösung die für den angewandten Pilz gün- 

 stigste Nährflüssigkeit. 



Als Nährlösungen werden empfohlen: 



Für Penicillium glaucum. Zu je 3 g Aminosäure in 500 cm^ 

 Wasser gelöst werden 10 on^ einer Nährsalzlösung gesetzt, die in einem 

 Liter enthält: 



45"3 g Chlorkalium , lO'ö g Magnesiumsulfat , 68"5 g Monocalcium- 

 phosphat, 1-05/7 Monokaliumphosphat. 



Den fertigen Lösungen wird noch etwas freie Phosphorsäure zuge- 

 fügt, so daß eine ziemüch stark saure Reaktion bestehen bleilit. 



Für Aspergillus niger. Pro 6g Aminosäure in einem Liter Wasser 

 werden aufgelöst 40,^ Zucker, bg Monokaliumphosphat, 2-b g Magnesium- 

 sulfat, 05 g Kaliumchlorid und 20 Tropfen einer ö^/oigen Eisenchloridlösung. 

 Die Nährlösung muß während des Versuches möglichst neutral gehalten 

 werden, da in sauren Lösungen das Wachstum des Pilzes stark leidet. 2) 

 Die Abstumpfung der Acidität gelingt am besten, indem man von vorn- 

 herein der Flüssigkeit etwas Calciumkarbonat zusetzt. 



Für Hefe, ög Aminosäure werden in einem Liter einer 10%igen 

 Zuckerlösung aufgelöst, die außerdem pro Liter enthält: 0-75^ Dikalium- 

 phosphat, 0"1 g Magnesiumsulfat, Spuren von Chlornatriura und Eisenvitriol. 

 Die anfängliche Reaktion der Lösung muß schwach sauer sein. 



Die in dieser Weise mit Nährsalzen versetzten Aminosäurelösungen 

 werden in die Glaskolben übergefüllt und nach Verschließen derselben mit 

 einem Wattebausch sterilisiert, indem man sie an je o — 5 aufeinander- 



1) E. Schulze und Boßhard, Untersuchungen über die Amidosäuren, welche bei 

 der Zersetzung der Eiweißstoffe durch Salzsäure und durch Barytwasser entstehen. 

 Zeitschr. f. physiol. Chemie. Bd. 10. S. 134 (1886). — E.Schulze imd A. Likieruik, Über 

 die Konstitution des Leucins. Zeitschr. f. physiol. Chemie. Bd. 17. S. 513 (1892). 



^) E. Czapek und E. Kohii, Beobachtungen über Bildung von Säure und Alkali 

 in künstlichen Xährsubstraten von Schimmelpilzen. Beiträge zur ehem. Physiologie und 

 Pathologie. Bd. 8. S. 302 (1906). — J. Xikitinski/, Jahrbücher f. wissenschaftl. Botanik. 

 Bd. 40. S. 1 (1904), zitiert bei E. Czapek. 



