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2. Reaktion von Hammarsten.^) ^lan verwendet ein zum min- 

 desten für 1 Jahr dauerhaftes Gemisch von 1 Yolum 25'Voifi'er Salpeter- 

 säure und 19 Volumina 25''/oi8er Salzsäure, das durch Stehen gelblich ge- 

 worden ist. Kurz vor Ausführung der Probe mischt man 1 Volum der 

 Säurelösung mit 4 Volumina Alkohol. Zu einigen Kubikzentimetern dieser 

 Säurelösung läßt man die auf I^)ilirubin zu prüfende Lösung tropfenweise hin- 

 zu. Im Fall der Bilirubinanwesenheit entsteht nach wenigen Tropfen eine 

 dauerhafte Grünfärbung. Durch steigenden Zusatz des Säurereagens kann 

 man schrittweise sämthche Farben der Gmelin^suh^w Farbenskala hervoi'- 

 rufen. 



Die Probe ist für P)ilirubin typisch, bedarf aber einer bestimmten 

 ]\linimalkonzentration des P)ilirubins. Bei Verwendung von Harn fällt man 

 daher den Farbstoff erst in der oben beschriebenen Weise als Kalksalz 

 und löst den Kalkniederschlag direkt in dem Reagens. 



3. Reaktion von Hupjjert-) auf Bihrubin. Man fällt das in Lö- 

 sung liefindliche Bilirubinalkali durch Kalkmilch bzw. Chlorcalcium-f Am- 

 moniak oder aus schwach saurer Lösung (Harn) durch das gleiche Vo- 

 lumen einer lOVoigen Chlorbaryumlösung. Den entstehenden Niederschlag 

 sammelt man auf einem Barytfilter oder durch Zentrifugieren. Der noch 

 feuchte, von der Flüssigkeit getrennte, eventuell mit AVasser gewaschene 

 Niederschlag wird mit schwach salzsaurem Alkohol längere Zeit zum Sieden 

 erhitzt. Bilirubinanwesenheit ruft eine smaragdgrüne bis blaugrüne Fär- 

 bung hervor. 



Modifikation von Nakayama.^) Man fügt zu dem genannten 

 Kalk- oder Barytniederschlag eine Probe einer Lösung von 99 Teilen 

 957oigeni x41kohol + 1 Teil roher rauchender Salzsäure + 4 ^ Eisenchlorid 

 pro l l der Alkohol-Säuremischung. Nach dem Sieden wird die Lösung 

 grün bis blaugrün, nach vorsichtigem Zusatz rauchender Salpetersäure zu 

 der blaugrünen Lösung geht die blaue Farbe in Violett oder Rot über. 

 Die Probe ist auJierordentUch empfindlich (1:1,000.000). 



4. Reaktion von Ehrlich.'^) Man extrahiert das Bihrubin der ge- 

 färbten Lösung oder den künstlich erzeugten Kalkniederschlägen mit Chloro- 

 form. Zu 1 Teil dieser Lösung setzt man 2 Teile einer lo/ooigen Diazo- 

 benzolsulfosäurelösung (durch Auflösen von 1 g p-Anihnsulfosäure in 1 / 

 Wasser, 15 cm^ konzentrierter Salzsäure und O"! g Natriumnitrit) und fügt 



^) 0. Hammarsten , Eine neue Reaktion auf Galleufarbstoffe, insbesondere im 

 Harn. Mahjfi Jahresb. 1898. S. 310. Upsala Läkareför. Förhandl. (N.F.). p. 4. 



= ) H. Huppert, Archiv für Heilkunde. Bd. 8. S. 351 u. 467 (1867); vgl. /. Munk, 

 Über den Nachweis des Gallenfarbstoffes im Harn. Arch. f. Anat. u. Phys. (Pbvs. Abt.) 

 S.861 (1898). 



^) M. Nakayama, t'ber eine Modifikation der Ilupprrfi^chen (ialloiifarltstoffreaktion. 

 Zeitschr. f. physiol. Chemie. Bd. 36. S. 398 (1902). 



*) P. Ehrlich, Sulfodiazobenzol , ein Reagens auf Bilirubin. Zentralbl. f. klin. 

 Med. Bd. 4. S. 721 (1883); vgl. hierzu Wiener klin. Wochenschr. Bd. 8. S. 173 (1898). 



