Methoden zur Aufarbeitung des Blutes in seine einzelnen Bestandteile. 167 



vorhandenen wasserlöslichen Substanzen befreit. Sollten dabei die in Wasser 

 unlöslichen Bestandteile sich nur schwer und langsam abscheiden, so kann 

 man die Abscheidung durch Kochsalzzusatz erleichtern und beschleunigen. 

 Man trennt die wässerige Flüssigkeit im Scheidetrichter ab ; sie reagiert 

 in der Regel schwach sauer und kann somit Seifen , die Cholesterin in 

 Lösung halten würden, nicht enthalten. Man wäscht die wasserunlösüchen 

 Bestandteile wiederholt mit Wasser (oder eventuell Kochsalzlösung) und 

 nimmt sie in Äther auf. Diese Lösung trocknet man über NagSO^ und 

 läßt sie teilweise verdunsten ; durch vorsichtigen Zusatz von Alkohol zu 

 der stark eingeengten Lösung erreicht man die Abscheidung fester Stoffe, 

 die man auf Ton über konzentrierter HoSO^ trocknet. Die vollkommen 

 wasserfreie, gelb gefärbte Masse behandelt man in der Wärme mit wenig 

 Alkohol ; dabei bleibt eine ohne weiteres Umkristallisieren reine, bei 76« 

 schmelzende Verbindung zurück, die den nachher zu beschreibenden Pal- 

 mitinsäurecholesterinester darstellt. 



Beim teilweisen Verdunsten der alkoholischen Lösung fällt Cholesterin 

 in den charakteristischen Tafeln aus; nach 2maUgem I^mkristallisieren aus 

 Alkohol ist es rein und schmilzt bei 144 — 145^. Aus etwa 30 1 Serum 

 (Pferdeblut) erhält man auf diese Weise etwa 0*30 g reines Cholesterin. 

 Für die quantitative Bestimmung ist das später beschriebene Verfahren von 

 Windaus zu empfehlen. 



Zur Isolierung der im Serum vorkommenden Cholesterinester 

 verfährt man nach Hürthle^) am besten in folgender Weise: 



Zur Darstellung des Ölsäurecholesterinesters wird das 

 Serum mit dem 3fachen \'olum Alkohol von 96o/o gefällt (Alkohol I). gut 

 durchgeschüttelt und über Nacht stehen gelassen. Dann wird die Flüssig- 

 keit auf einer Nutsche abgesaugt und das Filtrat in die Kälte gestellt, 

 wobei meist bis zum nächsten Tage einige Nadeln ausfallen, die aus Cho- 

 lesterinoleat bestehen; ihre Menge ist jedoch sehr gering, so dall man das 

 erste Filtrat füglich weggielien kann. 



Der von Flüssigkeit möglichst befreite Serumrückstand wird weiter 

 mit Alkohol zerrieben, und zwar wieder mit der .-ifachen Menge des ur- 

 sprünglich verwendeten Serums (Alkohol 11). Der Brei wird in eine Flasche 

 gebracht und mindestens über einen, besser über '2 — 6 Tage bei 34 — 40" 

 extrahiert, wobei die Flasche häufig umzuschüttein ist.-') Nach dieser Zeit 

 wird der Alkohol wieder abgesaugt und enthidt iiiiii fast die ganze Menge 

 des im Serum vorhandenen Olsäureesters in Lösung. Die Flüssigkeit wird 

 nun in die Kälte gestellt, wo sie bald trüb wird uml Itis zum nächsten 

 Tage mit nadeli'önnigen Kristallen erfüllt ist. die den Kster darstellen. 

 War (^r in iciclilicliei- Menge im Sernm enthalten, so fällt ein Teil sehon 

 bei Zimmertemperatur aus; um iini vollständig zu gewinnen, ist es nötig, 



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