Methoden zur Aufarbeitung des Blutes in seine einzelnen Bestandteile. 171 



Filter samt Niederschlag in einem Kolben mit einer genau gemessenen 

 Menge titrierter alkoholischer Kahlösung gekocht. Das verbrauchte Alkali 

 wird durch Zurücktitrieren des Überschusses bestimmt. Für die Berech- 

 nung ist zu berücksichtigen, daß 1 Molekül Cholesterin 1 Azetylgruppe 

 bindet. 



Das Cholesterin wird in Chloroform gelöst (für O'bg etwa bOcm^CllC]^) 

 und mit 25 cm^ einer nach v. Hübl bereiteten Lösung von Jod und Sublimat 

 in Alkohol versetzt. Der Überschuß an Jod wird mit Thiosulfat zurück- 

 titriert, da 1 xMolekül Cholesterin 2 Atome Jod addiert, ist die Berechnung 

 eine einfache Sache. 



Diese Methode ist genauer und führt rascher zum Ziele, als die vor- 

 her beschriebene Azetatmethode. 



Das genaueste Verfahren ist zweifellos das von IVindaus^) ausge- 

 arbeitete, das darauf beruht, daß freies Cholesterin mit Digitonin ein 

 recht beständiges Additionsprodukt liefert. Es gestattet freies Cholesterin 

 und Ester nacheinander in einer Portion zu bestimmen. 



Man verfährt folgendermaßen : Das zu untersuchende Material löst 

 man in der öOfachen Menge kochenden Göo/nigen Alkohols und versetzt 

 mit einer P/oigen Lösung von Digitonin in Alkohol (90%), so lange noch 

 ein Niederschlag entsteht. Nach mehreren Stunden wird auf dem Gooch- 

 tiegel al)gesaugt, mit Alkohol und Äther gewaschen, bei 100" getrocknet 

 und gewogen. 



Aus der Menge A des Additionsproduktes läßt sich die Menge C des 

 Cholesterins berechnen : 



A : C =: 1539-06 : 386-35 '-) oder C = A x 0-2431 . 



Das Filtrat des Digitonincholesterids wird konzentriert, nach Zusatz 

 von Wasser mit Petroläther oder Äther ausgeschüttelt ; das überschüssige 

 Digitonin bleibt in der wässerig-alkoholischen Flüssigkeit, während Chole- 

 sterinäther, Fette und andere Lipoide in den Petroläther übergehen. Man 

 destilliert den Petroläther ab, verseift den Rückstand mit Xatriumäthylat 

 in der Hitze, isoliert das gebildete Cholesterin durch Ausschüttehi mit 

 Petroläther und bestimmt das Cholesterin nach der Digitoniiimethode. ») 



Neben Cholesterin finck-n sich, wie Lifschiltz^) gezeigt hat. auch 

 noch sogenannte Oxycholesterine im P)lut. ilir Nachweis wird iu tolgeuder 

 Weise aef ührt : 



') A. Windaus, flicr die (luantilativc Bostimmuntr dos Cliolesterius und der 

 Cliolesteriiiostcr in ('ini;,n'ii ridiiiialrn und i)athologisclion Mieren. Zoitschr. f. plivsiol. 

 Cliciiiic. ({5. 110/117 (r.MOl. 



'-) M.-(J. des Additiuiis|)i(iduUti's l)ozioluint,'s\\fisc von l'lutli'sterin. 



•') Da das Diffitoniii icclit wertvoll ist, rnipfielilt es sich, es jeweils wiodorzu- 

 trewinnen. Dies ist Iciciit iniif^dicli dadurcii. dali mau das .Vdditiousprodiikt etwa 

 10 Stunden mit .\\l(il cxtialiicit (im Aiiparat von Stock-, siehe Heiiehtt« d. {»eutsrli. 

 ('liiMu. (icsellscii. i\{). I'.l7(i (IllOC)!. i'inc ALhildunt,' findet sieh dieses Haudlnieli. lid. 1. 

 S. IHU. Ki^,'. 3()H), wobei ihis Di^'iliuuu i|iiaiititativ in das \\lol üherireht. 



*) IjifsvhHlz, Die ()x\ihitiiins|ir(nlukl(> des ( luileslcrius in ih>n ticrisclien (hyaneii. 

 /eitschr. f. iih}siol. ( hcmii'. i>'.\ 1 10 (1',I07). 



