Partielle Hydrolyse der Nukleinsäuren. 497 



Die Darstellung der Pyrimidinnukleotide beruht auf der größeren Re- 

 sistenz dieser Komplexe im Vergleich mit den Purinkomplexen gegenüber 

 der Ein^virkung der Mineralsäuren. Während die Purinkomplexe durch 

 zweistündiges Erhitzen mittelst 2''/oiger Schwefelsäure vollkommene Aufspal- 

 tung in Phosphorsäureribose und Base erleiden, bleiben die Pyrimidinkom- 

 plexe bei dieser Behandlung größtenteils intakt. Die Gewinnung der Sub- 

 stanz wird nun auf folgende Weise ausgeführt: Je 100 g der Nukleinsäure 

 werden in 1 l 2%iger Schwefelsäure 2 Stunden am Rückfiußkühler im 

 Ölbade bei 125'' C gekocht. Die Flüssigkeit wird nur teilweise gekühlt und 

 mit reinem Silberoxyd bis zu einem Überschuß an Silber versetzt. Die 

 Silbersalze der Purinbasen scheiden sich dabei aus. Um die Fällung zu 

 vervollständigen, läßt man das Gemisch über Nacht stehen und entfernt 

 die Sill)erpurine durch Filtration. Das Filtrat neutralisiert man mit che- 

 misch reiner Barytlösung. Es scheiden sich dadurch die Silbersalze der 

 Nukleotide mit Silberphosphat aus. Der Niederschlag wird in Schwefel- 

 säure gelöst und mit Schwefelwasserstoff vom Silber befreit. Das Filtrat 

 vom Silbersulfid wird mit Barytlösung genau auf Phenolphtalein neutrah- 

 siert, vom Barytphosphat abfiltriert und bei vermindertem Druck fast bis 

 zur Trockne eingedampft. Ein Teil der Salze geht dabei in eine in W^asser 

 unlösliche Form über. Das Gemisch wird mittelst Essigsäure in Lösung 

 gebracht und die L()sung in absoluten Alkohol eingetragen. Die Baryumsalze 

 der Nukleotide scheiden sich dabei aus. Dieses Piohprodukt ist schon voll- 

 ständig frei von Nukleinsäure oder von Purin enthaltenden Komplexen. 

 Beim Arbeiten mit der Hefenukleinsäure läßt sich das schon daran leicht 

 erkennen, daß die Purinkomplexe eine starke Orzinprobe geben und nach 

 kurzer Hydrolyse mittelst jMineralsäure Fclilin (/i^c\\Q Lösung reduzieren 

 Dagegen geben die Barytsalze der Pyriniidiininkleotide nur eine ganz 

 schwache Orzinprobe, nach Hydrolyse mittelst .Mineralsäuren geben sie mit 

 Silbernitrat keinen Niederschlag der Purinsalze und auch keine Spur einer 

 Reduktion der Fchlini/si^hen Lösung. Die Substanzen sind optisch aktiv, 

 rechtsdrehend. Sie unterscheiden sich von Purinnukleotiden auch dadurch, 

 daß sie durch Niikleasen nicht angegriffen werden. 



Hydrolyse mit verdünntem Ammoniak. 



Zur Gewinnung der Pyrimidinkomplexe (h's Zytidins und Lridius aus 

 den Nukleoti(l(!U wird auf bilgcndcr Weise verfahren. 



Die Lösung der Bai'yumsalze wird quantitativ von Haryun» befreit. 

 Die resultierende Lösung reagiert stark sauer. Heswegen wird sie mit 

 wässerigem Ammoniak neutralisiert und dann mit einem Oberschuß von 

 Ammoniak l»is zu einem Gehall von ,">" „ versetzt, hie ammoniakalischo 

 Lösung vvii'd entwech'r im Finschmelzrohre hei |;>,")"(' oih'r im Autokhiven 

 bei dei' Tempei'atui' (h's Olhades von ITT)"!' ;P ., Slunth'n erhit/t. Hie Iso- 

 iiei'ung (h'r ryrimidinkom|ile\e beruht auf iiirer l.öshchkeit ii\ Alkohol, /um 

 Zwecke dei' Isolierung wird das lly«lrolysepi-o(lukt hei xcrminderteni Ihuck 

 bis zur Konsistenz eines Sirups eingedampft und der Kilckstand mit Al- 



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