Die Arbeitsmethoden bei Versuchen über Anaphylaxie. 557 



liehe anaphylaktische Ausschläge. In ähnlicher Weise könnte mit anderen 

 drüsigen Organen verfahren werden. 



6. Der Nachweis von Anaphylatoxin (E. Friedberger). 



Von besonderer Bedeutung für die Anaphylaxieforschung sind in 

 letzterer Zeit die Reagenzglasversuche geworden, unter ihnen wieder der 

 von E. Friedberger i) zuerst erbrachte Nachweis, daß beim Zusammentreffen 

 von Ambozeptor. Komplement und Antigen ein Gift in vitro sich bilde, 

 welches akut unter den Erscheinungen des anaphylaktischen Shocks die Tiere 

 zu töten vermag. Die dabei gebräuchliche Versuchstechnik, bei deren Wieder- 

 gabe wir uns an die Angaben E. Friedbergcrs anlehnen, ist die folgende: 



Bei der Gewinnung von Anaphylatoxin aus Eiweißlösungen 

 spielen, wie E. Friedberger und C.Vallardi'-) zuerst erkannten, folgende 

 Faktoren eine Rolle, deren genaue Berücksichtigung eine conditio sine qua 

 non für die Erzielung giftiger Abgüsse bildet: Die Beschaffenheit (Wertig- 

 keit) und Menge des Ambozeptors (also des Immunserums), die Antigenmenge, 

 die Komplementmenge und endlich die Zeitdauer sowie die äußeren Bedin- 

 gungen ihres gegenseitigen Aufeinanderwirkens. Als optimal hat sich den 

 Autoren die nachfolgende Versuchsbedingnng erwiesen: 



Bereitung der Antisera: Kaninchen erhalten pro Kilogramm 

 Körpergewicht 1 cm^ Hammelserum intravenös eingespritzt. Nach ö Tagen 

 wird die Injektion wiederholt und nach weiteren 7 — 8 Tagen eine Blut- 

 probe aus der Ohrveue entnommen. Wenn das Serum Hammeleiweiß min- 

 destens 1 : 10.000 in wenigen Minuten bei Zimmertemperatur präzipitiert, 

 wird das Tier entblutet, das Serum abgeschieden und kurze Zeit bei öö« 

 inaktiviert. Ein zu langes Inaktivieren schädigt die Giftbildung ganz enorm, 

 muß daher vermieden werden. 



Giftdarstellung: Mengen von je 2 cin^ des präzipitierenden Inimun- 

 serums werden mit je 1 cm» in gleicher Weise inaktivierten Ilammel- 

 serums versetzt. Die Proben kommen auf eine Stunde in den Brutschrank 

 und werden dann noch 24 Stunden bei Zimmertemperatur im Dunklen 

 stehen gelassen. Am nächsten Tage werden die Präzipitate von der ilar- 

 überstehenden Flüssigkeit abzentrifugiert, einmal, oder besser noch mehr- 

 mals mit physiologischer Kochsalzlösung zur Entferuung der letzten, an 

 sich giftig wirkenden .Viitiserumspuren gewaschen und mit je :>(W» frischen 

 Meerschw(rinclienk()ni|)lements versetzt. Zur (iewiniiung des Komplenu>nts 

 sollen selbstverständlicli nur nngeliraiichte. am besten HOO—. •>:'>()// .schwere 

 Meerschweinchen ausgiibliilrl und ihr Serum sofoit veiwendet werden. Die 

 Mischung von l'r;izii>itai nnd lunnplement wird wieder eine Stunde lu'i 

 vi?" und weitere 24 Stinulen bei Zimmertemperatur stehen gelassen, zentri- 

 fugiert und «h'r Abgnl'i, welcher das ficie Anai)hylatoxin enthält, auf seine 



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