Die Arbeitsmethoden liei Versuchen über Anaphylaxie. 



561 



^Yeiß vorbehanclelten Tieren erbracht und ihn später auch auf den Fall 

 der EiAveißanaphylaxie ausdehnen können. 



H. Pfeiffer und S. Mita verfuhren wie folgt: Nachdem weder die Ent- 

 eiweißungsmethode von Devoto, noch jene von Michaelis und Bona hier gang- 

 bar war, wählten die Verfasser die Enteiweißung durch die Hitze. Dazu 

 muß bemerkt werden, daß, um Fehler durch mangelhafte Enteiweißung zu 

 vermeiden, unbedingt Einübung in die Technik und sodann von vorne- 

 herein kleine Versuchsmengen notwendig sind. Sonst sind positive Biuret- 

 reaktionen auch bei den Kontrollröhrchen zu erwarten, die aber andrerseits, 

 wie Hunderte einschlägiger Kontrolluntersuchungen gelehrt haben, bei pein- 

 hchster Einhaltung der Technik konstant vermeidbar sind. Ich betone hier 

 neuerdings die Schwierigkeiten derartiger Versuche, auf welche jüngst auch 

 Schenk hingewiesen hat. Ich glaube al)er, und das im Hinblicke auf die neuesten 

 Versuche von E. Friedherger und S. Mita und im Hinblicke auf die große Zahl 

 unserer Kontrollversuche, jeden Irrtum methodischer Kxi ausschheßen zu dürfen. 



Die zu untersuchenden Seren und Serumgemische werden in der 

 Menge von 4 bis höchstens 8 cm^ mit der zehnfachen Menge destillierten 

 Wassers verdünnt und in einer Porzellan schale auf dem Wasserbade bis zu 

 zirka 80° erhitzt. Noch besser hat sich mir in jüngster Zeit Kochen der 

 Flüssigkeiten in Erlenmeierkölbchen in dem siedenden Wasser des Bades 

 bewährt. Unter fortwährendem Weitererwärmen wird tropfenweise sehr stark 

 verdünnte Essigsäure so lange zugesetzt, bis eine eben deutlich saure Re- 

 aktion gegen Lackmus nachweisbar wird, die Gerinnung des P^iweiß groß- 

 flockig erfolgt, dieses sich vollständig abscheidet, die Flüssigkeit daneben 

 vollständig wasserklar erscheint. Der Zusatz der Säure hat allmählich zu 

 erfolgen und es erfordert wie gesagt Übung, jene notwendige Grenze der 

 Azidität regelmäßig zu treffen, bei welcher eine vollständige Ausscheidung 

 des Eiweiß erfolgt. Als Kriterien, daß der Zusatz der Säure in der richtigen 

 Weise erfolgt ist, dienen, l)esser als das Verhalten gegen Lackmus: 1. die 

 großflockige Ausscheidung der koagulablen Eiwcilikörper: '1. die selbst bei 

 länger fortdauerndem Erhitzen fortbestehende, vollkommen wasserklare lie- 

 schaffenheit der Flüssigkeit und 3. ihr Verhalten bei der Filtration. Sie 

 fließt wie reines Wasser rasch durch das Filtei-. 



Nachdem zur Vergewisserung, daß auch alles in der Hitze koagulable 

 Eiweiß wirklich ausgefällt ist, noch (hirch zirka HO Minuten weiter erliitzt 

 worden war, wurde filtriert, das Filtrat auf die ursprüngliche Menge ein- 

 gedampft und damit die Biuretprobe angestellt. 



Ein vom Mccisi liwciiichcii gewonnenes lleispiel möge die ülnige \'er- 

 siichsaiiordniiiig klai'iiiaclieii : 



A li il IM' II 11 I (1 I' II , I liillillilli'li iIki Moi'llKiMihi'lli'll A l'ln'itHlllüIhlullMI. V 



36 



