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vermehrung nach K j e 1 d a h 1 's Verfahren verwendet; ich verdanke diese Arbeit 

 meinem früheren Assistenten, Herrn Chem. Ing. D. C. J. Minkman, der sich auch 

 in das Kulturverfahren eingeübt hatte. 



Anstatt humusreicher Erde, welche für die Anhaufungen verwendet wurde, 

 haben wir den zu analysierenden Nahrlösungen in Natriumkarbonat geloste Humus- 

 saure zugesetzt, welche aus Gartenerde zu Delft gewonnen war nach K r z e m i- 

 n i e f s k i's Vorschrift i). Dazu wird der in Wasser aufgeschlemmte Boden mit 

 Salzsaure versetzt, um die Humussaure aus den Humaten von Kalzium, Aluminium, 

 Eisen usw. freizumachen und zu prazipitieren ; die Chloride von Kalzium usw. und 

 das Salzsaureübermass werden ausgelaugt; aus der so gereinigten Erde wird die Hu- 

 mussaure mit Natronlauge extrahiert; aus dem dunkelbraunen Filtrat wird die Saure 

 mit Salzsaure aufs neue prazipitiert, filtriert, getrocknet und pulverisiert. Von solchen 

 Praparaten kann der geringe Stickstoffgehalt vernachlassigt werden, obschon sicher 

 nicht ungünstig für das Wachstum des Spirillunis; sie enthalten aber viel Asche und 

 darin findet sich kolloidale Kieselsaure, worauf die Hauptwirkung der Humate wohl 

 beruhen dürfte. 



In 100 ccm in Rundkolben einer Kultur, welche 1% Kalziummalat, 1/20% 

 K2HPOA und etwas sterile Gartenerde enthielt und infiziert war mit einer Azotohacter- 

 freien, aber fremde Bakterien enthaltenden Plattenkultur des Spirillunis, wurde nach 

 3 Wochen und Kultur bei 30° eine unzweifelhafte Stickstoffzunahme von 4,2 mg 

 gefunden, wahrend das Kalziummalat wohl ganzlich verschwunden war. 



Bei 3 anderen Versuchen in der gleichen Nahrlösung mit Zusatz von 0, 1 % Hu- 

 mussaure als Natriumhumat und Infizierung mit der treibenden Haut einer vor- 

 gehenden Kultur, resp. 5, 5,7 und 6,5 mg Stickstoffgewinn. 



Als wir derselben Nahrlösung 0, 1 % von Herrn Krzeminiefski aus Polen 

 stammende Humussaure als Natriumhumat zusetzten, erhielten wir 8,8 mg gebun- 

 denen Stickstoff. Solche Mengen waren eigentlich das doppelte von dem, was ich er- 

 wartet hatte. 



Um festzustellen, zu welcher Zeit das Kalziummalat bei solchen Versuchen ver- 

 schwunden ist, habe ich spater Kohlensaurebestimmungen ausgeführt nach Be- 

 handlung der Probe mit Salzsaure. Sofort stellte sich dabei heraus, dass nur solche 

 Proben, welche von Azotohacter- oder S^fn7/Mmkulturen herrührten, Kohlensaure- 

 mengen ergaben, welche nahezu dem zugegebenen Malat entsprachen; — bei deren 

 Abwesenheit war die Karbonatbildung sehr gering 2). 



Es scheint mir nicht ohne Interesse, noch darauf hinzuweisen, dass die Methode 

 der Kohlensaurebildung und -bestimmung in Erdproben, denen bestimmte Mengen 

 Kalziummalat, oder andere organische Salze wie -sukzinat, -laktat, -azetat, -zitrat 

 usw., ohne gebundenen Stickstoff zugesetzt werden, geeignet ist, auf einfache Weise 

 verschiedene Bodenarten zu vergleichen in bezug auf deren Oxydations- und Stick- 



1) Besonders angestellte Anhaufungsversuche mit dem Humuspraparat als Kohlen- 

 stoff- und Stickstoffquelle zugleich gaban bei der Infektion mit Gartenerde zu Delft einen 

 Micrococcus. 



2) Nur bei Versuchen mit Kalziumchinat habe ich auch bei Abwesenheit von Azotohacter 

 und Spirillum, aber bei Gegenwart einer Haut sehr feiner, unbekannter Bakterien alles Chi- 

 nat oxydiert gefunden, jedoch erst nach ca. 5 Wochen; wahrscheinlich war mein Chinat nicht 

 stickstofffrei. . • 



