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§ 125. Die yerdimuuugsmethode. 



Da die ersten Beobachtuugeu über Mikroorg-auismen g-eleg-entlicli 

 der raikroskopisclien Untersucliung- von Flüssig'keiten gemacht worden 

 sind und auch in der Folge alle Erfahrungen dafür sprachen, daß die 



5 meisten der Ivleinwesen sich in Flüssigkeiten oder wenigstens in stark 

 wasserhaltigen Nährböden vorzüglich entwickeln, so ist es selbstver- 

 ständlich, daß die anfänglichen auf Erzielung von Reiiizuchten gerichteten 

 Bestrebungen unter Benützung sterilisierter flüssiger Nährböden erfolgten. 

 Ob ein in seine Elemente zu zerlegendes Keimgemisch in einer Flüssig- 



lokeit oder in einem festen Körper (Käse, Butter, Erde usf) enthalten ist, 

 fällt übrigens bei der Lösung der Aufgabe nicht weiter in Betracht, 

 denn der letztere Fall läßt sich mit Leichtigkeit auf den ersteren zu- 

 rückführen, indem man sich durch Zerreiben einer Probe des festen 

 Körpers in sterilem Wasser eine Aufschwemmung bereitet und diese 



15 wie eine keimhaltige flüssige Probe weiter behandelt. Daß man in 

 letzterem Falle jedoch ab und zu mit großer Umsicht zu verfahren hat, 

 zeigt das auf S. 108 — 164 des Zweiten Bandes gegebene Beispiel der 

 Keimgehaltsbestimmung im Käse. 



Eecht oft tritt an den Mj'kologen die Aufgabe heran, die Keimzahl 



20 einer solchen Probe zu ermitteln, d. h. festzustellen, wieviel Zellindi- 

 viduen sie in der Raumeinheit enthält. Besonders bei Gärversuchen mit 

 Hefen wird man dazu oft Veraulassung haben, z. B. um aus dem Er- 

 gebnis der Keimzählung auf die Größe der während der Gärung ein- 

 getretenen Zellvermehrung rückschließen zu können. Aber auch bei 



25 Lösung spezifisch bakteriologischer Fragen kann eine solche direkte 

 Zählung von Nutzen sein, wenn auch gleich betont werden muß, daß 

 hier im allgemeinen weniger die Kenntnis der absoluten Zahl der in der 

 Volumeinheit einer Flüssigkeit vorhandenen Keime von Wichtigkeit ist, 

 als vielmehr die Zahl der lebenden, bezw. entwicklungsfähigen 



30 Keime. Eine direkte Zählung mit Hilfe des Mikroskopes läßt aber keine 

 Unterscheidung zwischen lebenden und abgestorbenen Lidividuen zu; 

 vergl. Bd. III, S. 417. Zu Zählungen der angedeuteten Art bedient 

 man sich der sogen. Zählkammern, deren Einrichtung und Gebrauch 

 auf S. 176 des Fünften Bandes erläutert ist. 



35 Angenommen, die Ermittlung des Keimgehaltes in einem Organismen- 

 geniisch, dessen Sonderung in die einzelnen Arten als Aufgabe vorliegt, 

 sei erfolgt. Kennen wir die Anzahl der Zellen in der Eaumeinheit, dann 

 verdünnen wir einen Teil der Pi-obe mit sterilisiertem AVasser so stark, 

 daß eine Zelle erst auf je 2 — 5 Tropfen fällt. Von dieser Verdünnung 



40 bringen wir nun je einen Tropfen in eine Anzahl von Gefäßen mit 

 steriler Nährlösung. Diese hält man dann bei geeigneter Temperatur. 

 Ein Teil der Kölbchen wird nach einiger Zeit Entwicklung erkennen 

 lassen: in diesen liegen die gesuchten Reinkulturen vor. falls die Impf- 

 tropfen, wie vorausgesetzt, höchstens einen Keim enthielten. Nach diesem 



45 Verfahren, welches ge wohnlich als V e r d ü n n u n g s m e t h o d e bezeichnet 

 wird, hat Lister im Jahre 1878 sein Baderium lacfis (s. Bd. IL S. 68) 

 reingezüchtet. Auch Fitz (1) bediente sich desselben bei seinen Studien 

 über Spaltpilzgärungen. Schon früher hatte Brefeld (1) einen ähnlichen 

 Weg benützt, um zu Reinkulturen von Schimmelpilzen zu gelangen. Die 



5u Größe der Zellen (Sporen) ermöglichte dabei auf mikroskopischem Wege 

 eine direkte Entscheidung der Frage, ob die Zucht wirklich von einer 

 einzigen Zelle aus sich entwickelt hatte. Die in der gärungsphysio- 



