92 PHYSIOLOGIE MICROBIENNE 



qu'on voudra, puis on ensemencera une gouttelette de liquide en une 

 série de bouillons de culture. Si la dilution est assez considérable, it 

 se pourra qu'une gouttelette ne renferme qu'un microbe et qui 

 donne en se développant dans le bouillon une culture pure. Peut- 

 être aura-t-on la chance que cette culture pure soit celle du microbe 

 spécifique. 



On pourra frotter légèrement à la surface du produit plurimicro- 

 bien (fausses membranes diphtériques p. ex,) un fil de platine, pui& 

 tracer avec celui-ci à la surface d'un milieu de culture gélatine ou 

 gélose des stries successives. Il se pourra (et cela se produit surtout 

 au niveau des dernières stries) que les microbes déposés soient assez 

 éloignés les uns des autres pour que les colonies dérivées ne soient 

 pas confondues ; il suffira de prendre une parcelle de ces colonies 

 séparées et de la transporter en bouillon pour avoir une culture pure. 



Il sera possible enfin de combiner les deux procédés : une très 

 petite quantité du produit plurimicrobien sera ajoutée à une grande 

 quantité de liquide stérile, et violemment agitée; une minuscule 

 quantité de ce liquide sera introduite en un bouillon gélatine liquéfié 

 à la température de 4o° et mélangée à la masse de ce bouillon. Par 

 refroidissement, la gélification se produit, fixant là où ils se trouvent 

 les microbes : ceux-ci en se développant peuvent fournir des cultures 

 isolées, auxquelles on ira puiser pour obtenir les cultures pures. 



Dans quelques cas particuliers oià il s'agira d'isoler des microbes 

 plus résistants que leurs voisins, on portera le produit plurimicrobien 

 à une température suffisante pour tuer tous les microbes sauf celui 

 qu'on se propose d'isoler ; ou bien on traitera le produit plurimi- 

 crobien par des antiseptiques ajoutés à dose suffisante pour détruire- 

 tous les microbes sauf le plus résistant d'entre eux. 



Quand, par un procédé quelconque, on a obtenu la culture pu^e^ 

 on ne manque pas d'en vérifier la pureté, n'oubliant pas qu'en bio- 

 logie, comme en arithmétique, il est nécessaire àe faire lapreuve. On 

 prélèvera donc une trace de la culture supposée pure et on l'ense- 

 mencera en stries sur de la gélose, ou on la mélangera avec un 

 bouillon gélatine liquifié qu'on laissera refroidir. Tous les colonies 

 qui se développeront sur ou dans ces milieux devront avoir la môme 

 npparence, les mêmes caractères macroscopiques et ne renfermer 

 qu'un seul et même microbe rcconnaissable à sa forme, à ses colora- 

 bilités, aux caractères de ses colonies poussées sur divers milieux, à 

 SCS propriétés biologiques ou chimiques, etc. 



Ayant obtenu une culture pure du microbe-témoin de la 

 diphtérie, nous faisons une longue série d'ensemencements^ 

 successifs, afin de ne conserver que les microbes et d'éli- 



