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ad 1. Der Ausstrich geschieht meistens mittels Platindraht oder einer 

 kleinen Öse. Vorsicht ist bei der Verteilung des Ausstriches notwendig, da unnötiges 

 Hin- und Herreiben vielfach die normale Lagerung der Bakterien zueinander und 

 zu den Gewebszellen verändert und auch Zellzerstörungen zur Folge hat. 



Körperzellenhaltige Flüssigkeiten, wie Blut, Eiter, Organteile usw. ver- 

 langen ein besonderes Ausstrichverfahren. Man taucht die Kante eioes Deck- 

 glases in das zu untersuchende Material und setzt dieses Deckglas mit der be- 

 netzten Kante, schräg, in einem Winkel von 30 — 45" auf das zu beschickende 

 Deckglas oder den zu beschickenden Objektträger auf, zieht es dann in der 

 Richtung des kleineren Winkels an dem in Frage kommenden Deckglase oder 

 Objektträger unter sanfter Berührung entlang, wodurch gleichmäßige und dünne 

 Ausstriche entstehen. 



In Fällen, wo es sich um schnelle Übersicht über die auf Kulturen ge- 

 wachsenen verschiedenen Bakterienkolonien handelt, legt man ein Klatsch- 

 präparat an, indem man mit einer Pinzette nach Ehrlich (Fig. 16, S. 366) 

 oder nach Kühne die Deckgläser faßt, sie dann auf die Kulturoberfläche fallen 

 läßt, sanft andrückt, und hierauf mit derselben Pinzette vorsichtig abhebt. Die 

 Cornetsche Pinzette, in welche die Deckgläser vor dem Ausstrich gespannt 

 werden, muß stets mit der Markierung nach oben gestellt werden, damit man 

 stets darüber orientiert ist, wo die Schichtseite des Präparates ist. Entsteht 

 dennoch ein Zweifel — bei dünnen Ausstrichen — , so kann man diese entweder 

 durch Spiegelnlassen des Glases (die Präparatenseite spiegelt nicht vollständig) 

 oder durch sanftes Ritzen mit einer Nadel erkennen. 



ad 2. Bei der Trocknung ist wohl eine mäßige Erwärmung zur Beschleuni- 

 gung gestattet, aber jede stärkere Erhitzung des Präparates zu vermeiden. 



ad 3. Die Fixierung soll das Präparat am Glase befestigen und durch 

 Homogenisierung des Eiweißes störende Niederschläge bei der Färbung hintan- 

 halten. Die Flammenfixation geschieht, indem das Glas mit der Präparatenseite 

 nach oben dreimal vorsichtig durch die Flamme gezogen wird. (Am vorteilhaftesten 

 ist es für Anfänger, Deckglas oder Objektträger zu diesem Zwecke zwischen zwei 

 Finger zu nehmen (bei nicht pathogenen Arten!) und dann gerade so langsam 

 durch die Flamme zu fahren, daß noch keine störende Hitzeeinwirkung auf die 

 Haut empfunden wird.) 



Statt der Hitzefixation verwendet man dort, wo eine Erhitzung nicht zweck- 

 mäßig ist, z. B. bei Blut- und Eiter präparaten, auch bei manchen Bakterienpräparaten 

 aus Kulturen, fixierende Chemikalien, und zwar: 



a) Äther und Alkohol zu gleichen Teilen bis zum Verdunsten. 



b) Absoluter Alkohol 20-30 Minuten. 



c) Methylalkohol 2—3 Minuten. 



d) Azeton 5 Minuten. 



e) Konzentrierte Sublimatlösung. 



f) Formalindämpfe 4—5 Sekunden. 



g) Osmiumdämpfe höchstens 30 Sekunden. 



Bei Färbung von Milchbakterien in Milch muß nach der Fixation das Milch- 

 fett durch Äther entfernt werden. 



Bei Blutpräparaten kann man, namentlich wenn es sich um dicke 

 Präparate handelt, das oftmals störende Hämoglobin durch 1- bis 2''/oige Essig- 

 säure vor der Färbung entfernen. Die zurückbleibenden Spuren von Essigsäure 

 müssen vor der Färbung durch öfteres Spülen in Wasser beseitigt werden. 



Eine gleichzeitige Hämoglobinextraktion und Fixation dicker Blutpräparate 

 — namentlich für Protozoennachweis — geschieht durch Einlegen der luft- 

 trockenen Präparate mit der Schichtseite nach imten in eine 2 "/o ige Formalin- 

 lösung, welcher Vo — 17o Essigsäure zugesetzt worden ist; nach einigen Minuten 

 wird gründhch in Wasser gespült, worauf das Präparat gefärbt werden kann. 



ad 4. Die Dauer der Färbung richtet sich sowohl nach dem Präparat als 

 auch nach der Konzentration des Farbstoffes. Für die konzentrierten Lösungen 

 genügt bereits eine Farbdauer von wenigen Sekunden bis zu 1 Minute. Mit Löffler- 

 schem Methylenblau und mit einer 1 : 20 verdünnten Karbol- Fuchsinlösung färbt 

 man am besten je nach dem Präparat zwischen 1 und 5 Minuten, mit einer verdünnten 

 Kristallviolettlösung (1 g Kristallviolett : 10000 Aq. dest.) 10-20 Minuten. Ver- 

 hältnismäßig längere Zeit als zur Färbung von Bakterien aus Kulturen braucht man 

 zur Färbung von Bakterien in Blut, Eiter, Organsäften, Exsudaten usw. Für die 

 Einhaltung der Färbezeit gebraucht man mit Vorteil Sanduhren. Beim Auf- 

 tröpfeln des Farbstoffes vermeide man das Berühren des Präparats durch die Pipette. 



