Methodik. 337 



ad 5. Die Wasserspülung nach beendigter Färbung geschieht meistens 

 durch Leitungswasser, das man entweder in sanftem Strahl auf Präparatseite und 

 Rückseite des Glases spritzt oder zweckmäßig auch in Wassergläsern füllen kann, 

 in welchen dann mittels der Cornetschen Pinzette das Präparat geschwenkt wird. 

 Ein häufiges Wechseln des Waschwassers in den Wassergläsern ist unerläßlich. 



ad 6. Die Trocknung muß vollständig erfolgen, weil sonst bei Mischung 

 noch vorhandenen Wassers mit öl oder Kanadabalsam Trübungen entstehen; 

 daher muß man das Präparat meistens nach Behandlung mit Fließpapier noch 

 eine Zeit lufttrocken werden lassen. 



ad 7. Kanadabalsam und Zedernöl müssen vollkommen säurefrei sein. 



Die Gramsche Färbung. 



Das Verfahren nach Gram beruht auf der Eigentümlichkeit, 

 daß Bakterien durch Färbung mit Pararosanihnen (Gentianaviolett, 

 Methylviolett) und nachträghche Behandlung mit Jod entweder ganz 

 oder in gewissen Teilen eine dunkelblauviolette Färbung annehmen, die 

 bei gewissen Bakterien durch Alkoholspülung nicht oder nur nach 

 längerer Einwirkung entfernt werden kann. Diese Bakterien nennen 

 wir grampositiv, im Gegensatz zu jenen gramnegativen Bak- 

 terien, bei denen der Alkohol die Farbe rasch anzieht. 



Ursprünghch wurden für die Gramsche Färbung Anihnwasser- 

 farblösungen angewandt: man nimmt in ein Reagenzglas eine Kuppe 

 voll Anilinöl und füllt dann das Reagenzglas mit Wasser drei Viertel 

 voll und schüttelt kräftig durch. Jedenfalls muß so viel Anilinöl ge- 

 nommen werden, daß nach dem Durchschütteln noch ungelöstes Ani- 

 linöl zurückbleibt. Die Öllösung wird durch ein angefeuchtetes Filter 

 filtriert, in welchem sämtliche Öltropfen zurückbleiben müssen, so 

 daß ein wasserklares Filtrat resultiert. Nun setzt man so viel ge- 

 sättigte alkoholische Gentianaviolett- oder Methylviolettlösung zu, 

 bis ein schillerndes Häutchen an der Oberfläche entsteht. Die Anihn- 

 wasserfarblösungen müssen stets vor dem Gebrauch frisch bereitet 

 werden, sind deshalb jetzt meistens durch Karbolgentianaviolettlösung 

 oder wässerige Lösung von Kristallviolett Höchst (das ist ganz reines 

 Methylviolett), die beide unbegrenzt haltbar sind, ersetzt. 



Färbung von Ausstrichen nach Gram: 



1. Ausstrich des Präparats. 



2. Fixierung. 



3. Kristallviolett (1—5 g ad 1000 g Aq. destill.) oder Karbol- 

 gent iana violett unter leichtem Erwärmen 2 Minuten. 



4. Jodjodkaliumlösung (Jod 1,0, Jodjodkalium 2,0, Aq. dest. 

 300,0) 1 Minute. 



5. Entfärbung mit mindestens 96%igem Alkohol, bis zu 10 Sek. 



6. Wasserspülung. 



7. Kurze Gegenfärbung mit Fuchsin (konzentrierte Lösung 

 1 : 20 Wasser), Bismarckbraun, Saffranin usw. 



8. Wasserspülung. 



9. Trocknung. 



10. Einbettung mit Zedernöl oder Kanadabalsam. 



Nach Gram sind färbbar, also grampositiv: 



Streptokokken, Staphylokokken, Pneumokokken, Tetragenus- 

 kokken, Sarcine, Diphtheriebazillen, Pseudodiphtheriebazillen, 

 Xerosebazillen, Milzbrandbazillen, Tuberkelbazillen, Leprabazillen, 



Lehrbuch der Bakteriologie. 22 



