Methodik. 341 



Die Bakterien und Geißeln erscheinen schwarz auf hellem 

 Untergrund, 



Die Methode von Zettnow gibt besonders gute Resultate. 



n. Herstellung und Färbung von Schnittpräparaten. 



A. Härten von Gewebestücken. 



Es dürfen nicht über 1 ccm große Gewebestücke genommen 

 werden. Diese werden in absoluten Alkohol gebracht, welcher, da er 

 den Geweben Wasser entzieht und hierdurch verdünnt wird, oftmals 

 zu wechseln ist. Im absoluten Alkohol müssen die Gewebestücke in 

 der Regel zum mindesten 3 Tage verbleiben. (Vorteilhaft ist unter 

 die Gewebestücke Watte zu legen, damit sie nicht in die tieferen wasser- 

 haltigen Regionen des Glases zu liegen kommen.) Im Alkohol halten 

 sich die Gewebestücke jahrelang. 



Wenn auch die Härtung mit Alkohol für die meisten bakterio- 

 logischen Zwecke genügt, so gehen doch infolge der schrumpfenden 

 Wirkung des Alkohols feinste histologische Details verloren. Wo es 

 sich in besonderen Fällen darum handelt, auch derartige zarte 

 Strukturen zur Anschauung zu bringen, kann man der Alkoholhärtung 

 vorangehen lassen eine Formalin- oder Sublimatfixation. 



Zum Zwecke der Formalinfixation gibt man die Organstücke 

 für 5 — 24 Stunden in 10%ige Formalinlösung, worauf dann die Prä- 

 parate in Alkohol absol. nachgehärtet werden. 



Die Sublimatfixation geschieht entweder in einer konzentrier- 

 ten Sublimatlösung oder in einer 3%igen Sublimatlösung, welch letzterer 

 1% Essigsäure zugesetzt wird. Hierauf wird 24 Stunden zum Zwecke der 

 Sublimatbeseitigung gewässert, hierauf werden die Stücke in 70%igem 

 Alkohol, dem Jod zugesetzt ist, verbracht, dieser jodhaltige Alkohol 

 öfters gewechselt. Hierauf Nachhärtung in absolutem Alkohol. 



1, Die so gehärteten Gewebestücke können ohne weitere Be- 

 handlung direkt mit Glyzeringelatine (Gelatine 10,0, Glyzerin 

 40,0, Wasser 20,0 durch Erhitzen gelöst) auf Korkstückchen oder 

 Holzwürfel aufgeklebt werden; die Präparate werden nun für einige 

 Stunden in absoluten Alkohol gebracht, in welchem die Glyzerin- 

 gelatine erstarrt, worauf dann das Präparat geschnitten werden kann. 

 Das Mikrotommesser muß mit 80 %igem Alkohol befeuchtet werden; auch 

 die Schnitte werden in 80%igem Alkohol aufgefangen, 



2, Einbettung in Paraffin, Die in Alkohol gehärteten, 

 nicht aufgeklebten Organstücke werden durch 2—6 Stunden (je nach 

 der Größe) in Xylol getaucht, bis sie durchscheinend geworden sind. 

 Sodann werden sie in ein offenes Schälchen mit einer gesättigten 

 Lösung von Paraffin in Xylol verbracht, und dieses an einen warmen 

 Ort gestellt. Hier verdunstet das Xylol allmählich, gleichzeitig dringt 

 das Paraffin in das Innere der Stücke ein. Sodann werden die Stücke 

 in heißes Paraffin, dessen Schmelzpunkt bei ungefähr 50° C liegt, 

 gelegt und so in einem Thermostaten von ungefähr 50° durch 12 Stunden 

 belassen. Wenn nun die Gewebe von Paraffin gänzlich durchtränkt 

 sind, werden die Stückchen herausgenommen, auf eine reine Glasplatte 

 in der für das Schneiden geeigneten Stellung gelegt, sodann wird ein 

 viereckiger, ungefähr 2 cm hoher Rahmen aus Glas, Metall oder Pappe 

 um das Präparat gelegt und mit heißem Paraffin gefüllt; schnelles Ein- 



