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2. Spülen in Wasser bis das anfangs grünliche Spülwasser blau- 

 rot wird. 



3. Mit Fließpapieren leicht abtrocknen. 



4. Abspülen in absolutem Alkohol durch wenige Sekunden. 



5. Wenn keine rötlichen Farbwolken mehr abgehen, Aufhellung 

 in Xylol. 



6. Einschließung in Balsam oder Zedernöl. 



(s. auch VI.: die vitale Färbung nach Plato). 



IT. Methode der Silberimprägnienmg der Spirochaeten in Schnitten 



nach Levaditi. 



1. Höchstens 2 mm dicke Organscheiben werden 24 Stunden in 

 einer 10%igen Formalinlösung fixiert. 



2. 96% Alkohol 12-15 Stunden. 



3. Destilliertes Wasser, das mehrmals gewechselt wird, bis die 

 Scheiben zu Boden sinken. 



4. Imprägnierung in folgender frisch bereiteten Mischung von 

 90 ccm l,5%iger Silbernitratlösung und 10 ccm reinsten Pyridins in 

 dunkler mit Glasstopfen fest verschlossenen Flasche 2—3 Stunden bei 

 Zimmertemperatur und weitere 3—5 Stunden bei 45—50" C, eventuell 

 bis zu 6 Tagen bei Zimmertemperatur. 



5. Abspülen in 10%iger Pyridinlösung. 



6. Ohne Wasserspülung in folgende frische Mischung: 90 ccm 

 einer frischen 4%igen Pyrogallollösung mit 10 ccm Azeton; 85 ccm dieser 

 Lösung -j- 15 ccm Pyridin purissimum in dunkler Flasche mit Glas- 

 stopfen; 15 Stunden bis 2 Tage. 



7. Abspülen mit Wasser, Härtung in Alkohol von steigenden 

 Konzentrationen, Einbettung in Paraffin. Die Spirochäten erscheinen 

 schwarz versilbert. 



V. Färbung säurefester Bakterien. 



Die Methoden beruhen auf dem Prinzip, daß sich die säurefesten 

 Bakterien schwer färben, aber die einmal angenommene Farbe sehr 

 intensiv festhalten (bedingt durch fett- und wachsartige Stoffe) des 

 Bakterienkörpers). 



a) Methode nach Ziehl-Neelsen für Ausstriche. 



1. Färbung der fixierten Ausstriche mit konzentriertem Karbol- 

 fuchsin unter Aufkochen 2 Minuten. 



2. Entfärbung entweder in 5%iger Schwefelsäure oder 20%iger 

 Salpetersäure durch 10 Sekunden mit darauffolgender Differenzierung in 

 70% Alkohol bis das Präparat schwach rosa bis farblos erscheint, 



oder Entfärbung in Vereinigung der Säure- und Alkoholbehand- 

 lung mit 70% Alkohol, dem 3% Salzsäure zugesetzt ist, 10 Sekunden. 



3. Wasserspülung. 



4. Nachfärbung mit wässeriger oder Löfflerscher Methylen- 

 blaulösung. 



5. Wasserspülung usw. 



b) Korallin-Methylenblaumethode. 

 1, Färbung der Ausstriche mit Karbolfuchsin wie bei Ziehl- 

 Neelsen. 



