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beruht darauf, daß statt des losen Deckels ein aufschraubbarer dampf- 

 dichter Deckel benutzt wird. Die Temperatur wird durch einen Thermo- 

 regulator geregelt und konstant gehalten. 



Substanzen, die eine höhere Temperatur als 100" vertragen, 

 werden namentlich, wenn es sich um Sporenabtötung handelt, im 

 Autoklaven sterilisiert, welche meist mit 2 Atmosphären Über- 

 druck = 130° arbeiten. Auch an diesen Apparaten sind Regulatoren 

 angebracht, welche den gewünschten Überdruck konstant erhalten. 



Viele Substanzen verändern sich durch allzulange Sterihsation 

 bei hoher Temperatur, so leiden auch unsere gebräuchHchen Nähr- 

 böden unter allzulanger Dampfeinwirkung. Daher wendet man die 

 fraktionierte Sterilisation nach Tyndall an, indem man die Sub- 

 stanzen an drei aufeinanderfolgenden Tagen je ^/g Stunde im strömen- 

 den Dampf sterilisiert. Es soll bezweckt werden, daß die vegetativen 

 Formen der Bakterien bereits mit der ersten Sterilisation abgetötet 

 werden, während den Sporen Gelegenheit zum Auskeimen in vege- 

 tative Formen gegeben wird, die nun den nächsten Tag, eventuell 

 am 3. Tage abgetötet werden. 



Die angegebene Sterilisationsdauer bezieht sich auf die Zeit, in 

 welcher der zu sterilisierende Nährboden tatsächlich der vorgeschriebenen 

 Temperatur ausgesetzt ist. Man muß daher den Sterilisationsbeginn 

 von dem Zeitpunkte aus berechnen, wo die vorgeschriebene Tem- 

 peratur im Dampftopfe erreicht ist. Außerdem muß man auch die Zeit 

 des Eindringens der Hitze bis in die Mitte der Nährbödengefäße eben- 

 falls in Abrechnung bringen. Man wird deshalb zu sterilisieren haben 

 Nährbodenröhrchen ^^ Stunde, Nährbodenkolben von 1—1^ 1 In- 

 halt 1 Stunde, von 2—5 1 Inhalt 1^—2 Stunden, von 5—10 1 Inhalt 

 2-21/2 Stunden. 



Bei eiweißhaltigen Substanzen, so z. B. Körperflüssigkeiten aller 

 Art, erfolgt bei einer Erhitzung über 60" Koagulation des Eiweißes. 

 Will man diese Substanzen steriHsieren, ohne daß Koagulation ein- 

 tritt, so kann man dies erreichen, wenn man sie an 5— 8 aufeinander- 

 folgenden Tagen bei einer Temperatur von 58—60° je l—V-^ Stunden 

 erhitzt und so fraktioniert sterilisiert. 



Es sei hier bemerkt, daß einerseits diese, wenn auch schonende 

 fraktionierte Sterihsation bei 58—60° dennoch vielfach die Substanzen 

 schädigt, so daß sie für manche Nährböden weniger brauchbar werden, 

 und daß andererseits doch nicht immer Keimfreiheit erzielt wird. 

 Es ist daher ratsam, wenn möghch Körperflüssigkeiten, wie z. B. 

 Serum, Aszites, Hydrozelenflüssigkeit usw., steril zu entnehmen. Bei 

 Schlachthoftieren kann man das vom Blut sich absetzende Serum mit 

 Erfolg durch Auffangen über Chloroform (Kirchner) sterilisieren. 

 Vor dem Gebrauch kann dann das Chloroform, welches bereits bei 65° 

 siedet, durch mäßiges Erwärmen verdampft werden. 



Außerdem kann man zum Zwecke der keimfreien Gewinnung 

 der Substanzen Bakterienfilter anwenden. 



3. Herstellung der Nährböden. 



Allgemeine Regeln, 

 a) Die Nährböden müssen in Glasgefäßen bereitet sein, welche 

 kein Alkali abgeben. 



