Methodik. 353 



b) Die Nährböden müssen steril sein (s. voriger Abschnitt). 



c) Wichtig ist für die Bereitung der Nährböden die Neutrali- 

 sierung und Alkalisierung der Nährböden. 



Für gewöhnlich wird der Lackmusneutralpunkt bestimmt: 

 Man fügt zum flüssigen resp. flüssiggemachten Nährboden unter 

 Umschütteln mit der Pipette tropfenweise konzentrierte Soda- 

 lösung hinzu, bis blaues Lackmuspapier sich nicht mehr röte't, 

 bzw. Lackmusneutralpapier unverändert bleibt. Von diesem 

 Lackmusneutralpunkt ausgehend, fügt man die entsprechende 

 Menge Normalsodalösung bzw. Normalsalzsäurelösung hinzu. Für die 

 meisten Zwecke genügt es, wenn man zu 1 1 eines lackmusneutralen 

 Nährbodens 10 ccm Normalsodalösung hinzusetzt. Zum Wachstum 

 von Choleravibrionen, Streptokokken, Pneumokokken usw. verwendet 

 man Nährböden mit stärkerem Alkalizusatz. 



Genauer (für manche Zwecke unerläßlich), wenn auch umständ- 

 licher, ist die Herstellung der Reaktion vom Phenolphthaleinpunkt 

 aus: 5 ccm des Nährbodens werden mit 45 ccm destillierten Wassers 

 ein paar Minuten gekocht. Hierauf werden einige Tropfen Phenol- 

 phthalein zugesetzt; Rotfärbung zeigt alkalische Reaktion, Farblosigkeit 

 saure Reaktion an. Nun bestimmt man durch vorsichtige Titration mit 

 ^/lo-Normalalkali bzw. ^/iQ- Normalsäure genau die Alkali- bzw. Säure- 

 menge, welche zur NeutraUsierung von 5 ccm Nährboden nötig sind. 

 Man kontrolliert nochmals mit Vioo-Normallösung, rechnet dann auf 

 die gesamte Nährbodenmenge um. Je nach dem gewünschten Alkali- 

 grad (der Phenolphthaleinneutralpunkt bedeutet eine stark alkalische 

 Reaktion gegen Lackmuspapier) setzt man dann die Hälfte oder zwei 

 Drittel der berechneten Menge zu dem Gesamtnährboden zu. 



d) Die Nährböden sollen klar sein. 



Zur Vermeidung von Trübungen nach der Filtration verwendet 

 man die Klärung mit Hühnereiweiß. Entweder wird der gesamte 

 Inhalt von ein oder zwei Eiern in einem Glase zerrührt und dann 

 zu den auf 50° abgekühlten Nährböden hinzugefügt, oder es wird 

 zu diesem Zweck nur das Weiße der Eier verwandt; die Nährboden- 

 kolben werden nunmehr stark geschüttelt und etwa ^/g Stunde im 

 Dampftopf gekocht. 



Statt Eiern kann auch eine 20%ige Lösung von käuflichem Eiweiß 

 oder Tierkohle genommen werden. 



e) Wichtig ist eine gute Filtration der Nährböden. 



Die Filtration kann erfolgen durch Koliertücher, Filtrierpapier 

 oder Watte. 



Die Filtration durch Koliertücher gibt, wenn man von dem 

 Auftreten eines kleinen Niederschlages absieht, für die meisten Zwecke 

 brauchbare Resultate. 



Ganz klare Nährböden erreicht man beim Filtrieren durch Fil- 

 trierpapier, welches am besten als doppeltes Faltenfilter benutzt 

 wird. Bei Bouillon, Gelatine geht die Filtration durch diese Falten- 

 filter schnell und gut vonstatten; schwieriger gestaltet sich die Fil- 

 tration bei Agar, welcher nur langsam filtriert. Hier muß wegen der 

 sonst erfolgenden Erstarrung des Nährbodens im Filter die Filtration 

 oft stundenlang im Dampf topf oder unter Zuhilfenahme eines heiz- 

 baren Trichters erfolgen. Unter dieser langen Erhitzung kann 

 die Beschaffenheit der Agarnährböden leiden, 



Lehrbuch der Bakteriologie. 23 



