Methodik. 



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Reinzüchtung auf Gelatine in Petrischalen. 



Das Verdünnungsverfahren ist dasselbe, wie es R. Koch für sein 

 Plattenverfahren ausgearbeitet hat. Zur Entnahme und zur Verimpfung 

 des bakterienhaltigen Materials verwendet man Platindrähte, die ent- 

 weder in der ursprünglichen Form als Platinnadel verwandt werden 

 oder die durch Umbiegen der Spitze als Platinöse (s. Fig. 13) Anwen- 

 dung finden (Herstellung s. Fig. 14). Das Verfahren geht folgender- 

 maßen vor sich: 



Vier bis fünf Röhrchen mit Gelatine werden im Wasserbade bei 

 30—40° verflüssigt. Ist das Ausgangsmaterial eine Flüssigkeit, so wird 

 eine vorher ausgeglühte Öse von dem Material (bei 

 sehr keimarmem Material auch mehrere Ösen) in die 

 X flüssige Gelatine verimpft, nachdem zuvor der Rand 



des Röhrchens in der Flamme erhitzt worden ist. Durch 

 Drehen, Neigen und Heben der Röhrchen wird für eine 

 gleichmäßige Verteilung des 

 Materials in der Gelatine 

 Sorge getragen. Von festem 

 Material wird mittels aus- 

 geglühter Platinnadel ein 

 Spürchen in die verflüssigte 

 Gelatine gebracht, indem 

 zunächst das Material ober- 

 halb der Gelatine an der 

 Außenwand des Glases ver- 

 rieben und sodann mit der 

 Gelatine emulsioniert wird. 

 Nach der Verimpfung des 

 Materials wird der Watte- 

 pfropfen, der zwischen 4. 

 und 5. Finger so gehalten 

 werden soU, daß er nirgendswo infiziert wird, eventuell zur Sicher- 

 heit schnell in der Flamme angesengt und wiederum auf das Reagenz- 

 glas, dessen Rand zuvor nochmals durch die Flamme gezogen werden 

 kann, aufgesetzt, sodann wird durch Senken, Heben und Rollen des 

 Reagenzglases das Material gleichmäßig verteilt. 



Meistens ist in diesem ersten Röhrchen der Bakterienreichtum 

 zu groß, als daß man auf das Wachstum isolierter Kolonien rechnen 

 könnte. Es wird daher mit der ausgegliihten Platinöse unter aseptischen 

 Kautelen eine Menge von vier bis fünf Ösen vom ersten Gelatineröhrchen 

 auf ein zweites Gelatineröhrchen übertragen, in welchem die Verteilung 

 nach derselben Methode wie im ersten erfolgt. Es ist darauf zu achten, 

 daß beim bakteriologischen Arbeiten stets die Reagenzröhr- 

 chen — sei es mit Gelatine oder mit anderen NährmateriaMen — schräg 

 gehalten werden müssen, da bei senkrechter Stellung Staub und 

 damit Bakterien aus der Luft in die Kultur hereingelangen können. 



Ist das Material sehr keimreich gewesen, so impft man in der- 

 selben Weise vom zweiten Verdünnungsröhrchen einige Ösen auf ein 

 drittes, eventuell vom dritten auf ein viertes usw. Auf diese Weise 

 kann man mit Sicherheit darauf rechnen, daß durch die von Röhrchen 

 zu Röhrchen erfolgende Abnahme der Keimzahl schließlich das Wachs- 



Fig. 13. Kolle- 



sclier Nadelhalter 



mit Platinöse. 



Fig. 14. Platinösenmaßstab 

 n^ch Czaplewsky. 



