Methodik. 369 



material beimpften Agarröhrchen durch 5—10 Minuten auf 80® kann 

 man unter Umständen durch Ausschaltung der in nur vegetativen 

 Formen wachsenden Bakterien eine Reinkultur erhalten. Das anaerobe 

 Verhalten der in Frage stehenden Bakterien erkennt man daran, daß 

 trotz gleichmäßiger Verteilung des Ausgangsmaterials im ganzen 

 Agarröhrchen ihre Kolonien nur in den tieferen Schichten des Agars 

 wachsen, während das Wachstum in den oberen Schichten, wohin 

 noch der Luftsauerstoff diffundiert, oder gar an der Agaroberfläche 

 ausbleibt. 



Handelt es sich um die Verimpfung von Reinkulturen auf hohe 

 Agarröhrchen, so kann man die Methode der Stichkulturen anwenden: 

 Die frisch ausgekochten Agarröhrchen werden in kaltem Wasser schnell 

 erstarren gelassen; mit einer langen Platinnadel wird in der Achse des 

 Agarzyhnders das Material durch einen Stich verimpft. Den Sauer- 

 stoffzutritt durch den Stichkanal kann man verhindern durch Über- 

 schichten mit Agar, flüssigem Paraffin usw. ; empfehlenswert ist auch 

 eine einfache Methode, nach welcher die oberen Agarpartien der Stich- 

 kulturröhrchen in der Flamme verflüssigt und dann zum Erstarren 

 gebracht werden. 



Die weitere Untersuchung dieser Kulturen erfolgt am besten 

 folgendermaßen: Man zerschlägt über einem Sublimatgefäß den Boden 

 des Reagenzröhrchens und schüttelt den Agarzylinder in eine bereit- 

 stehende sterile Petrischale aus. Mit einem sterilen Messer kann man 

 den Agar durchschneiden und so die einzeln gewachsenen Kolonien 

 bzw. die einzelnen Partien des Stiches mikroskopisch untersuchen bzw. 

 von ihnen Weiterimpfungen vornehmen. 



2. Beseitigung des Sauerstoffes durch chemische Mittel. 



Man kann auf einfache Weise Anaerobenzüchtung vornehmen, 

 indem man durch Zusatz reduzierender Mittel zum Nährboden den 

 Sauerstoff des Nährmediums beseitigt. Solche reduzierende Mittel sind 

 Zucker, ameisensaures Natron, indigschwefelsaures Natron u. a. 



So findet bei Zusatz von Schwefelalkali auch bei Luftzutritt 

 Anaerobenwachstum statt. 



Auf demselben Prinzip beruht die Anaerobenzüchtung nach 

 Tarozzi: 



In frisch aufgekochte Bouillon* werden 1 ccm große steril ent- 

 nommene Organstücke (Leber, Milz, Niere, Gehirn, Muskel usw,) ver- 

 senkt (von der Sterihtät kann man sich durch 24 stündigen Aufenthalt 

 der Röhrchen bei 37" überzeugen). Trotz Luftzutritt findet Anaeroben- 

 wachstum statt. Statt der Organstücke kann man mit gutem Erfolge 

 auch Scheiben oder Würfel gekochter Eier verwenden. 



Ferner kann man in luftdicht verschlossenen Gefäßen durch 

 ChemikaUen eine Absorption des Sauerstoffes erzielen. Hierfür ver- 

 wendet man vornehmlich alkalische Pyrogallussäurelösung. 



In ein Buchnerröhrchen (s. Fig. 18a u. b) (das ist ein großes 

 Reagenzglas mit einem Drahtgestell zur Aufnahme eines zweiten 

 Reagenzglases) bringt man 1 g Pyrogallussäure (gelöst in 3 ccm Wasser) 

 und dazu 1 ccm einer 0,l%igen Kalilaugelösung. Das geimpfte 



Lehrbuch der Bakteriologie. ^-4 



