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Anreicherungsverfahren für Tuberkelbazillen. 



a) Sedimentierverfahren nach Biedert. Das Sputum wird 

 mit der 2— 4fachenMenge 0,2%iger Natronlauge in Zyhndern mit Gummi- 

 stopfen 1—2 Minuten äußerst kräftig geschüttelt (eventuell muß noch 

 etwas Natronlauge bis zur vollständigen Homogenisierung der Flüssig- 

 keit zugesetzt werden). Die Flüssigkeit wird in eine Porzellanschale 

 gebracht und unter Umrühren bis zum Sieden erhitzt. Nun werden 

 1—2 Tropfen Phenolphthaleinlösung hinzugefügt und mit verdünnter 

 Essigsäure neutraUsiert. Sedimentieren im Spitzglase oder nach Zu- 

 satz der doppelten Menge absoluten Alkohols leicht zentrifugieren. 

 Verarbeiten des Sedimentes zu gefärbten Präparaten. 



b) Sedimentierverfahren nach Sachs-Müke. Zusatz von 

 geringen Mengen Wasserstoffsuperoxyd bewirkt Verflüssigung des 

 Sputums unter Schaumbildung. Die Tuberkelbazillen sind im Schaum 

 färberisch nachweisbar oder im Sedimente, welches nach Zusatz von 

 großen Mengen Alkohol sich bildet. 



c) Antiforminverfahren nach Uhlenhuth. 20 ccm Sputum 

 werden mit 15 ccm Antiformin (das ist ein Gemisch von Liquor Natrii 

 hypochlorosi und Alkahhydrat) versetzt und die Gesamtmenge wird 

 sofort auf 100 ccm mit sterilem destilliertem Wasser aufgefüllt. Unter 

 öfterem Kühren bleibt das Ganze 2—5 Stunden stehen, je 10 ccm 

 werden zentrifugiert, der Bodensatz wird in 10 ccm steriler 0,8%iger 

 Kochsalzlösung aufgeschüttelt, zentrifugiert, vom Waschwasser voll- 

 ständig befreit. Sodann wird in gleicher Weise nochmals mit Koch- 

 salzlösung gewaschen und nochmals zentrifugiert. Vom Bodensatz 

 werden dann je 4—5 Ösen auf eine Anzahl Glyzerinagar- oder Gly- 

 zerinserumröhrchen fest verrieben. Das Sediment kann auch — es 

 genügt hierfür ein einmaliges Waschen — mittels Eiweiß auf Objekt- 

 träger zum Haften gebracht und zur Bazillenfärbung verwendet 

 werden. — Das Antiformin läßt die Tuberkelbazillen am Leben, während 

 es die Begleitbakterien abtötet und auflöst. 



Modifikationen des Verfahrens sind von Schulte, Löffler u. a. 

 angegeben worden. Das Sediment kann auch zu Tierversuchen ver- 

 wendet werden. 



d) Ligroinmethode nach Lange und Nitsche. Sputum 

 wird mit Kalilauge homogenisiert und dann mit Ligroin kräftig aus- 

 geschüttelt. Aus dieser dichten Emulsion scheidet sich bei Erwärmung 

 das Ligroin nach oben ab und reißt die Tuberkelbazillen mit sich, 

 die sich dann in der Grenzschichte vorfinden. 



e) Kombiniertes Antiformin-Ligroinverfahren nach 

 Schulte. 10 ccm Sputum werden mit 20 ccm 20%igem Antiformin ver- 

 setzt. Umschütteln. Das Ganze bleibt bis zur vollkommenen Homo- 

 genisierung unter zeitweiligem Umschütteln stehen. Sodann werden 

 20 ccm Wasser zugesetzt. Das Ganze wird umgeschüttelt. Sodann 

 Zusatz von 2 ccm Ligroin. Schütteln, bis eine dichte Aufschwemmung 

 entsteht. Im Wasserbade von 60° wird das Ligroin klar abgeschieden, 

 sodann wird tropfenweise ^/g— 1 ccm Brennspiritus zugesetzt und sofort 

 von der Grenzschichte Material zur Färbung von Tuberkelbazillen ent- 

 nommen. 



f) Doppelmethode nach Ellermann und Erlandsen. 10 

 bis 15 ccm Sputum werden in einem zugekorkten Glaszylinder mit der 



