902 Methodisches (Fixierung und Nachbehandlung). 



wie sie oft genannt werden — - und ebenso den Kern usw. derart verändert haben, 

 daß Wasser und Alkohol nachträglich keine bedeutenden Änderungen mehr hervor- 

 bringen können. Gerade gegenüber dem bei jeder Reaktion, und zwar dauei'haft 

 gegen Wasser usw. fällenden konzentrierten Sublimatlösungen und dem absoluten 

 Alkohol, der allerdings Albumosen nicht dauerhaft fällt, stellt die Osmiumsäure 

 ein Fixierungsmittel dar, das bei entsprechender Nachbehandlung (s. u.) eine Reihe 

 von Organen, bzw. deren Zellen in einem Zustande erhält, der ihre Architektur 

 sehr ähnlich der am frischen, überlebenden Präparat zu beobachtenden darstellt. 

 Es gibt daher schon eine ganze Reihe von Histologen (Henneguy, Leqons .sur la 

 cellule, p. 42 u. 61), welche das Sublimat durchaus verwerfen, da es Artefakte her- 

 vorbringe. — Wenden wir die Osmiumsäure oder das Alt mann sehe Gemisch da- 

 gegen auf Schleimzellen an {Gland. sitbmaxiüaris, retrolingualis, orbitalis usw.), 

 so erhalten wir keine unveränderte Fixierung, es sei denn, daß die Osmiumsäure 

 in Gegenwart von sehr wenig Flüssigkeit einwirke. Langley') beobachtete, daß 

 Osmiumsäurelösungen von 0,5 bis 2 Proz. die Granula der Schleimdrüsen schwellen 

 machten. Die Granula wui-de dabei immer undeutlicher, und bei Vorhandensein 

 von Osmiumlösung in großem Überschuß verschAvanden sie, indem sie in Lösung 

 gingen ; zugleich entstand durch dies Schwellen der Granula ein feines Netzwerk 

 (s. u.). Hing er dagegen kleinste Stückchen der frischen Drüse in Osmiumdampf, 

 so konnten die Drüsenzellen in einem dem frischen gleichenden Zustande erhalten, 

 die Stücke in Paraffin geschnitten und die Schnitte in Methylenblau gefärbt werden. 

 In der Vorschrift (Proc. Physiol. Soc. 2 [1889]) für die Nachbehandlung gibt 

 Langley folgendes an: Abwaschen der Stücke in Wasser für wenige Minuten, 

 30 Proz. und 50 Proz. Alkohol je 15 Minuten, 75 Proz. und 95 Proz. Alkohol je eine 

 halbe Stunde, darauf eine bis zwei Stunden in absolutem Alkohol, Va ^is 1 Stunde in 

 Benzol und dann Einbetten in hartes Paraffin. Die stark quellende Wirkung von 

 Alkohol auf frische Schleimgranula äußert sich nach L angle j' bis zur Konzentration 

 von 70 Proz. ; starker Alkohol läßt die Gi-anuia in unregelmäßigen Formen schrumpfen. 

 Hardy'^) hat in einer eingehenden Studie über das Verhalten von kolloidalen 

 Lösungen gegenüber Fixationsmitteln auch vergleichsweise das Verhalten von 

 Granulis reiner Schleimdrüsen {Gl. orbitalis vom Kätzchen) untersucht. Fixierte 

 er Stückchen der Drüse in absolutem Alkohol, so wurden dieselben keineswegs da- 

 durch vollständig gehärtet, denn in dünnem Alkohol oder in Wasser wurden sie 

 wieder weich. Die Granula waren nur zum Teil und nur in etwas gequollenem 

 Zustande erhalten, zum Teil waren sie verschwunden oder krümelig geschrumpft 

 bzw. zu mehreren verklumpt. Dünne Schnitte der in Alkohol gehärteten Drüse, 

 mit alkoholischem (90 Proz.) Methylenblau gefärbt, ließen alles, was Schleimgranu- 

 lum war oder von Schleimgranulis stammte (Klumpen usw.), in sattem, opakem 

 Blau erscheinen, indes das homogene Protoplasma an der Zellbasis und die von 

 ihm ausgehende intergranuläre Substanz (Wabenwerk) schön grün gefärbt waren. 

 Berieselte Hardy dünne Schnitte solcher in absolutem Alkohol gehärteter Pi-äparate 

 mit Methylenblaulösung in verdünntem Alkohol und beobachtete günstige dünnste 

 Stellen am Rande des Präparates, so sah er — bei einer Konzentration von 60 Proz. 

 — die Granula schwellen und rasch etwa ihr doppeltes Volumen annehmen, indem 

 ihre Durchmesser im Verhältnis 3 : 4 wuchsen. Sie bleiben dabei noch deutlich 

 sichtbar, aber ihr opakes Blau geht in einen durchscheinenden Purpurton über, 

 das intergranuläre Wabenwerk ändert seine Farbe von Grün in Blau. Geht der 

 Prozentgehalt der alkoholischen Methylenblaulösung noch weiter herab, so schwellen 

 die Granula immer mehr an, werden immer undeutlicher, zuletzt sieht man nur 

 noch das blau gefärbte Wabenwerk, das jetzt zu außerordentlich dünnen Wänden 

 ausgedehnt ist. Ist der Alkoholgehalt bis auf 40 Proz. gefallen, so kann man durch 

 Steigerung der Alkoholkonzentration die Zellen und Granula wieder auf ihr an- 

 fängliches Volumen schrumpfen machen, aber die Granula erlangen ihre starke 

 Färbbarkeit nicht wieder. Fällt die Konzentration auf 30 Proz., so zerreißt das 

 Zellprotoplasma ; hält man sie aber über diesem kritischen Wert, so kann man die 



^) Proc. Roy. Soc. 40, 342, 1886 u. Journ. of Physiol. 10, 423, 1889 und 

 Proceed. Phys. Soc. 1889, No. 2. — ^) Journ. of Physiol. 24, 150 ff., 1899. 



