Methodisches (Fixiei-ung und Nachbehandlung). 903 



Zellen und Granula mehrmals schwellen und schrumpfen machen. Granula sowohl 

 als Zellen schwellen Immer zusammen auf und ab; die Größe einer fixierten Zelle 

 zeigt nicht, ob und wieviel sie bei der Fixation etwa geschwollen ist. 



Die Übertragung in Xylol und die Einbettung in Paraffin änderten dann den 

 phj'sikalischen Zustand des Gewebes erheblich ; das "Wabenwerk (Protoplasma- 

 gerüst) ist jetzt vollständig fixiert und unausdehnbar geworden, die Granula da- 

 gegen hatten noch einen, wenn auch gelungen Grad ihrer Quellbarkeit behalten. 

 An sehr dünnen Schnitten schoben sie sich daher beim Quellungsversuch über die 

 dünnen "Wabenwände empor. Das Protoplasmagerüst zeigte noch den Zusammen- 

 hang mit dem basalen Plasma, es färbte sich mit Methylenblau grün, aber die 

 Granula hatten ihre Färbbarkeit vollkommen eingebüßt. Die Messung ergab, daß 

 Granula und Maschen sich an Zahl entsprachen, daß aber die ungequoUenen 

 Granula die Maschen nicht ganz ausfüllten ; es war also wohl ein leicht löslicher 

 Stoff bei der Fixation aus dem kolloidalen Plasma oder aus den Granulis oder 

 aus beiden ausgetreten. An den sehr dünnen Schnitten — sie waren mindestens 

 halbmal so dünn als die mittlere Maschenweite — waren die Maschenfäden immer 

 ohne Lücken, es konnte also nicht sowohl ein Netzwerk, als vielmehr der 

 Durchschnitt durch ein "Waben werk (honeycomb) vorliegen. 



Die Fixation allerkleinster Stücke der Drüsen (von neugeborenen Kätzchen, 

 also mit sehr zai-tem Gewebe) in Osmiumdampf zeigte, daß nach achtstündiger 

 Suspension und Nachbehandlung mit absolutem Alkohol, Xylol und Einbettung in 

 Paraffin, Aufkleben der Schnitte mit 95 proz. Alkohol die Granula noch quellbar 

 waren in "Wasser; erst eine 24 stündige Fixation machte sie annähernd unquellbar, 

 aber auch hier waren selbst an kleinen Stücken nicht sämtliche Granula kon- 

 serviert, vielmehr fanden sich in manchen Zellen etliche aneinandergeklumpt, 

 indes der Eest der Zelle von distinkten Körnern erfüllt war. Dies liegt meiner 

 Ansicht nach daran, daß in Schleimdrüsen manche Granula durch Flüssigkeits- 

 aufnahme oder sonstige Änderung — in frischen Zellen erscheinen sie matter, 

 weniger deutlich — sich gegen die übrigen schon verändert haben und dann solche 

 Zusammenballungen zeigen. 



Aus dem Gesagten geht hervor, daß nur die Vergleich ung der Bilder des 

 frischen, noch lebenden oder überlebenden Gewebes und derjenigen, welche durch 

 das Fixierungsmittel erhalten wurden, über "Wert oder Unwert eines solchen ent- 

 scheiden kann ; daß dabei nicht versäumt werden darf, durch successive Einwirkung 

 der für die „Nachbehandlung" zu verwendenden Substanzen ("Waschflüssigkeiten, 

 Entwässerungsmittel) auf Schnitte, die vom Organ direkt aus der Fixierungs- 

 flüssigkeit gewonnen wurden, sich zu überzeugen, ob die Fixierung diesen gegen- 

 über eine vollkommene war, oder ob nicht einzelne Strukturelemente noch nach- 

 träglich Veränderungen unterliegen. Die auffallend ungenügende Fixierung, welche 

 Schleimdrüsen durch das Altmannsche Gemisch mit der üblichen Nachbehandlung 

 des Spülens in fließendem "Wasser, Härtens in steigendem Alkohol usw. erfahren 

 (vgl. hierfür Fig. 1 , Taf. 28 der zweiten Auflage des Altmannschen "Werkes, wo 

 die Schleimzellen nur leere Maschen und allein die „Halbmonde" eine granuläre 

 Struktur zeigen), hatte mich schon im Jahre 1889, als ich unterAltmanns Leitung 

 arbeitete, auf den Gedanken gebracht, die anscheinend auf Schleimzellen so stark 

 quellend wirkenden wässerigen Osmiumlösungen durch solche in Kochsalzlösungen 

 zu ersetzen. Die damals an Becherzellen damit erhaltene gute Konservierung der 

 Schleimgranula hat mich dann später veranlaßt, die OsO^ Gl Na -Lösungen weiter 

 auszuprobieren. Dabei fand ich jedoch, daß einmal diejenigen Drüsen, welche, wie 

 die Submaxillaris der meisten Tiere, nicht reine Schleimdrüsen sind, sich recht 

 verschieden gegenüber dem gleichen Fixans verhalten, zum anderen aber, daß auch 

 reine Schleimdrüsen — wie die Gl. orbitalis — verschiedener Tiere ebenfalls un- 

 gleiche Resultate unter wenigstens äußerlich gleichen physiologischen Bedingungen 

 (Hunger usw.) geben. Eine Lösung von 5 Proz. OsO^ in 3 proz. ClNa-Lösung, 

 gemischt mit V3 Volumen kalt gesättigter KaUbichromatlösung, gibt für die Sub- 

 maxillaris der Katze, für fast alle Becherzellen, für die Glandula orbitalis der 

 Katze ausgezeichnete Resultate, indes sie vorläufig für andere, z.B. für die Retro- 

 lingualis des Igels, versagt. 



