Die Blutkörperchenzählung und Hämoglobinbestimmung. 7^9 



III. Die Bestimmung des Blutfarbstoffs. 



Die roten Blutkörperchen sind hei höheren Tieren die einzigen Blut- 

 elemente, die roten Blutfarbstoff, Hämoglobin, enthalten. Will man den 

 Hämoglobingehalt im Kubikzentimeter Blut ermitteln, so muß man die 

 roten Blutzellen auflösen und das Hämoglobin austreten lassen. 



Die Bestimmung der Farbintensität einer solchen Blutlösung geschieht 

 nach denselben Prinzipien, nach denen auch sonst kolorimetrische Ver- 

 gleiche angestellt werden, nur bedingt die nicht unbegrenzte Haltbarkeit 

 sowie die je nach der Gassättigung leicht wechselnde Farbennuance der 

 verdünnten Blutlösung bestimmte Vorsichtsmaßregeln. 



Allgemeine Bemerkungen. 



Den meisten Untersuchern ist es erwünscht, ihr Auge vor Neben- 

 licht zu schützen und nur das die Blutfarbstofflösung passierende rötliche 

 Licht auf die Netzhaut wirken zu lassen. Man wird daher, w^enn möglich, 

 im Dunkelzimmer arbeiten oder einen Mikroskopierkasten benutzen. Ein- 

 facher ist eine aus geschwärzter Pappe hergestellte Röhre, in der sich 

 Öffnungen für die beiden Augen befinden. 



Man hat störende Reflexe von der Oberfläche der Farbstofflösung 

 oder von den Glasteilen des Apparates zu vermeiden. Weiter müssen so- 

 wohl die abschließenden Glasflächen, welche das Licht passiert, wie die zu 

 untersuchende Lösung selbst absolut staub-, fett- und gerinnselfrei sein, und 

 Luftblasen selbstverständhch fehlen. Es ist bekannt, wie selbst für das 

 bloße Auge nicht sofort merkliche Trübungen die Absorptionskraft einer 

 Lösung außerordenthch stark verändern. Die Glasteile sind daher mit nicht 

 fasernden , weichen Tüchern zu reinigen, da Schrammen im Glas den Gang 

 der Lichtstrahlen ablenken. Die zu untersuchende Lösung muß vor dem Ein- 

 füllen filtriert werden. 



Endlich darf die Blutlösung nach Herstellung der erforderlichen Ver- 

 dünnung nicht längere Zeit aufgehoben werden: Im allgemeinen verän- 

 dert unverdünntes defibriniertes Blut auf Eis aufbewahrt seine Färbe- 

 kraft im Laufe von 24 Stunden nicht, w^enn man es kurz vor dem Versuch 

 mit Luft kräftig schüttelt. Doch kommen auch Ausnahmen vor. Hundert- 

 fach verdünntes Blut dagegen liefert oft schon nach wenigen Stunden ab- 

 norme Zahlen. Es ist sehr zu beachten, daß die mit dem Blut in Berüh- 

 rung kommenden Glasgefäße, die ja trocken sein müssen, nicht durch 

 Äther getrocknet werden,^ da der im Laboratorium verwendete gewöhnliche 

 Äther meist beim Verdunsten etwas Rückstand hinterläßt und auch ohne- 

 dies nicht ganz frei ist von kleinen Mengen von Substanzen, die das Hä- 

 moglobin in Methämoglobin verwandeln und damit die Absorptionskraft 

 wie den Farbenton der Blutlösung stark ändern. Man hat häufig genug 

 beobachtet, wie Blut, das in mit äthergetrockneten Glasgefäßen aufbewahrt 



Abderhalden, Handbuch der biochemischen Arbeitsmethoden. III. 46 



