g^^4 Peter Rona. 



Größere Moiiffen (200—500 cin'^) von Harn werden mit Mononatriumpliosphat ganz 

 schwach angesäuert, auf dem Wasserbade (eventuell unter weiterer Zugabe dieses Salzes, 

 wenn die Reaktion wieder ins Alkalische umschlägt) auf V3 bis '/. eingedampft. Zum er- 

 kalteten Urin werden einige Kubikzentimeter 207oiger H,SO^ zugegeben. Xach 24 Stunden 

 wird die abgeschiedene Hippursäure und Benzoesäure (a) auf einer kleinen Xutsche ab- 

 gesaugt. Der Niederschlag wird 5— lOmal mit ganz kleinen Mengen eiskalten Wassers 

 gedeckt, das Waschwasser jedesmal erst nach 1—2 Minuten langer Berührung mit dem 

 Niederschlag abgesaugt, bis derselbe kein Chlor und keine Schwefelsäure mehr enthält. 

 Filtrat und Waschwasser werden vereinigt und weiter behandelt (b). 



Der Niederschlag a wird im Vakuum über Schwefelsäure getrocknet und gewogen. 

 Dann wird er im Soxhletapparat mit Petroläther vollständig erscliöpft. der Pctroläther 

 in einer Porzellanschale freiwillig verdampft, der Rückstand mit wenig Petroläther oder 

 Äther in ein kleines, zum Wägen geeignetes Gefäß gespült. Nach dem freiwilligen Ver- 

 dampfen und 24stündigem Stehen im H, SO^-Exsikkator (kein Vakuum!) wird die freie 

 Benzoesäure gewogen (a-Benzoesäure). Die Hippursäure ergibt sich aus der Differenz. 



Die schwefelsauren Filtrate und Waschwässer (b) vom Niederschlag (a) werden 

 durch Eintragung von feingepulvertem Ammonsulfat nahezu gesättigt; die amorphen, 

 stark gefärbten Niederschläge werden abfiltriert, mit konzentrierter Ammonsulfatlösung 

 nachgewaschen. Das ca. 200—400 cm^ betragende Filtrat wird in einem Ätherextrak- 

 tiousapparat erschöpft, was 2—3x8 Stunden erfordert. Der Rückstand vom freiwillig 

 verdunsteten Äther wird in Normallauge gelöst, im Schütteltrichter mit H^SO^ versetzt 

 und mit Petroläther die freie Benzoesäure extrahiert. Die Hippursäure (b), die in dem 

 wässerigen Rückstand geblieben ist, wird durch Kochen mit starker KOH zerlegt, die 

 frei gewordene Benzoesäure nach dem Ansäuern mit Petroläther gelöst, gewogen und 

 auf Hippursäure (b) umgerechnet. Bei dem gewöhnlichen Verfahren, wo nicht erst die 

 Abtrennung der Hauptmenge durch Säurefälluug erfolgt, kann ein Teil der „gebundenen 

 Benzoesäure" aus Benzoyl-Glukuronsäure stammen. (Diese an sich in Äther unlöslich, 

 geht bei gleichzeitiger Anwesenheit von viel Hippursäure und Benzoesäure in großen 

 Mengen in den Äther.) 



Homogentisinsäure. 



Die Homogentisinsäure, 2 , 5-Dioxyphenylessigsäure, CgHgO^, findet sich im 

 Harn bei der Alkaptonurie. Kristallisiert mit einem Molekül Wasser in Prismen. Ist leicht 

 löslich in Wasser, Alkohol, Äther, fast unlöslich in Chloroform. Benzol, Toluol, Petrol- 

 äther. Schmilzt bei 146-5— 147". Sublimiert scheinbar unverändert; das Sublimat färbt 

 sich allmählich schön blau. Die wässerige Lösung färbt sich dunkel, besonders schnell 

 bei Gegenwart von Ammoniak, Natronlauge. Reduziert neutrale oder ammoniakalische 

 Silberlösung, wie auch alkalische Kupferlösung schon in der Kälte. Mit Millons Reagenz 

 in der Kälte ein zitronengelber, allmählich orange-farbiger Niederschlag; beim Erwärmen 

 wird der Niederschlag gleich hell ziegelrot. Mit Eisenchlorid vorübergehende Blaufärbung. 

 Das Bleisalz ( Cg H, 0/), Pb -4- 3 H„ kristallisiert in Nadeln und in Prismen; schmilzt bei 

 214—215". Unlöslich in Alkohol und in Äther; schwer löslich in Wasser (in 675 Teilen). — 

 Das Lakton der Homogentisinsäure entsteht beim Erhitzen über 100", schmilzt bei 

 191"; kristallisiert in kurzen Prismen. In kaltem Wasser wenig, in heißem Wasser ziem- 

 lich leicht löslich. Gibt mit Millonschem Reagenz Rotfärbung. Die wässerige Lösung 

 reduziert neutrale Silberlösung nicht, erst auf Ammoniakzusatz. 



Der Alkaptonharn wird an der Luft, besonders nach Alkalizusatz, dunkel, 

 reduziert Fehli/ußche Lösung in der Kälte, wie auch neutrale und ammoniakalische 

 Silberlösung, gibt mit Eisenchlorid eine blaue Färbung, mit Millons Reagenz einen 

 zitronengelben, beim Erwärmen ziegelroten Niederschlag. 



Zur Darstellung der Homogentisinsäure benutzt E. Meyer'^) den 

 Äthylester der Silure. Der nach Zusatz von Ho SO4 eingedampfte Harn 



*) E. Meyer, Über Alkaptonurie. Deutsch. Arch. f. klin. Med. Bd. 70. S. 443 (1901). 



